一、砷盐检查法

砷盐是有毒的物质，多由药物生产过程所使用的无机试剂引入。《中国药典》采用古蔡法和二乙基二硫代氨基甲酸银法检查药物中微量的砷盐。

标准砷溶液的制备 称取三氧化二砷0.132g，置1000ml量瓶中，加20%氢氧化钠溶液5ml溶解后，用适量的稀硫酸中和，再加稀硫酸10ml，用水稀释至刻度，摇匀，作为储备液。

临用前，精密量取储备液10ml，置1000ml量瓶中，加稀硫酸10ml，用水稀释至刻度，摇匀，即得。

  1．古蔡法  古蔡法检查砷的原理是利用金属锌与酸作用产生新生态的氢，与药物中微量砷盐反应，生成具有挥发性的砷化氢气体，遇溴化汞试纸，产生黄色至棕色的砷斑，与一定量标准砷溶液在相同条件下所生成的砷斑比较，来判断药物中砷盐的含量。其反应式如下：

AsO+3Zn+9H+AsH3↑+3Zn2++3H2O

AsH3+2HgBr22HBr+As (HgBr)2  黄色

AsH3+3HgBr23HBr+As(HgBr)3  棕色

  古蔡法检查砷的装置如图7-l所示。

图7-1  古蔡法检查砷的装置

A．砷化氢发生瓶  B．中空磨口塞  C．导气管  D．具孔有机玻璃旋塞

E．具孔有机玻璃塞盖

  检查时，首先于导气管C中装入醋酸铅棉花60mg(装管高度约60mm～80mm)，再于旋塞D的顶端平面上放一片溴化汞试纸，盖上旋塞E并旋紧。标准砷斑的制备方法为：精密量取标准砷溶液2ml，置A瓶中，加盐酸5ml与水21ml，再加碘化钾试液5m1与酸性氯化亚锡试液5滴，在室温放置10分钟后，加锌粒2g，立即将装妥的导气管C密塞于A瓶上，并将A瓶置25℃～40℃水浴中，反应45分钟，取出溴化汞试纸，即得。另取规定量的供试品，加水23ml溶解后，照标准砷斑制备方法操作，将供试品砷斑与标准砷斑比较，不得更深。

  碘化钾和氯化亚锡的主要作用是还原五价的砷(如)成三价的砷(如)，因为五价砷在酸性溶液中虽然也能被还原为砷化氢，但生成砷化氢的速度较三价砷慢。

  锌粒及供试品中可能含有少量硫化物，在酸性溶液中能产生硫化氢气体，与溴化汞作用生成硫化汞的色斑，干扰试验结果。在导气管中装入适量醋酸铅棉花，用以吸收产生的硫化氢气体。

用三氧化二砷配制标准砷贮备液，临用前取贮备液新鲜配制标准砷溶液，每1ml标准砷溶液相当于1μg的As。《中国药典》规定，标准砷斑用2ml标准砷溶液(相当于2μg As)制备，可得清晰的砷斑，过深或过浅均会影响比色的正确性。

  2．二乙基二硫代氨基甲酸银法(Ag-DDC法)  本法的原理为砷化氢与Ag(DDC)吡啶溶液作用，使Ag(DDC)中的银还原为红色胶态银。Ag(DDC)的结构为：

 化学反应式为: 

  本法的装置如图7-2所示。

图7-2  Ag-DDC法检砷装置

A.砷化氢发生瓶  B.中空磨口塞  C.导气管  D.平底玻璃管(具5.0ml刻度)

检查时，首先于导气管C中装入醋酸铅棉花60mg(装管高度约60mm～80mm)，并于D管中精密加入二乙基二硫代氨基甲酸银试液5ml。在砷化氢发生瓶A中，供试溶液(或标准砷溶液)的试验条件与古蔡法相同，加锌粒后，立即将生成的砷化氢导入盛有Ag(DDC)溶液5.0ml的D管中，将A瓶置25℃～40℃水浴中，反应45分钟后，取出D管，添加氯仿至5.0ml，将供试溶液D管和标准溶液D管同置白色背景上，自管上方向下观察比色。必要时，可将吸收液移入25px吸收池中，以Ag(DDC)溶液为空白，于510nm的波长处，测定吸收度，供试溶液的吸收度不得大于标准砷溶液的吸光度。若供试品需经有机破坏后再进行砷检，则应取标准砷溶液代替供试品，照各品种项下规定的方法同法处理后，依法制备标准砷对照液。

本法需用有机碱吸收反应中产生的二乙基二硫代氨基甲酸(HDDC)。USP(24)采用本法检查砷盐时，配制成0.5％Ag(DDC)的吡啶溶液，灵敏度较高，但缺点是吡啶有恶臭。《中国药典》采用0.25％Ag(DDC)的三乙胺-氯仿(1.8 ׃ 98.2)溶液，其灵敏度略低于吡啶溶液。