盐酸普鲁卡因及其制剂的分析

    盐酸普鲁卡因为常用的局部麻醉药，是对氨基苯甲酸和二乙氨基乙醇的酯与盐酸形成的盐，其结构式如下：

                     盐酸普鲁卡因

 盐酸普鲁卡因分子结构中的芳香第一胺(通常称为芳伯氨)基能发生重氮化反应；酯键可发生水解。盐酸普鲁卡因易溶于水，在乙醇中略溶，在氯仿中微溶，在乙醚中几乎不溶。

一、盐酸普鲁卡因的分析

(一)鉴别

1．水解反应  取供试品约0.1g，加水2ml溶解后，加10%氢氧化钠溶液1ml，即生成白色沉淀；加热，变成油状物，继续加热，发生的蒸气使润湿的红色石蕊试纸变为蓝色；热至油状物消失后，放冷，加盐酸酸化，即析出白色沉淀。

 盐酸普鲁卡因遇氢氧化钠试液即游离出普鲁卡因白色沉淀，该沉淀熔点低，受热成为油状，继续加热则水解，产生挥发性二乙氨基乙醇和对氨基苯甲酸钠。二乙氨基乙醇使湿润的红色石蕊试纸变为蓝色。含有对氨基苯甲酸钠的水溶液放冷后，加盐酸酸化，生成对氨基苯甲酸的白色沉淀，加入过量的盐酸，生成其盐酸盐而溶解。

2．红外光谱法  盐酸普鲁卡因分子结构中存在芳伯氨基、苯环、酯基等基团，其红外光谱中显示相应的吸收峰：

      《中国药典》规定，本品的红外吸收图谱应与对照的图谱一致。

     3．氯化物的反应  盐酸普鲁卡因中的Cl－，按《中国药典》附录“一般鉴别试验”中“氯化物”项下的沉淀反应和氧化还原反应进行鉴别。

  沉淀反应：取供试品溶液，加稀硝酸使成酸性后，滴加硝酸银试液，即生成白色凝乳状沉淀；分离，沉淀加氨试液即溶解，再加稀硝酸酸化后，沉淀复生成。

 氧化还原反应：取供试品少量，置试管中，加等量的二氧化锰，混匀，加硫酸润湿，缓缓加热，即发生氯气，能使润湿的碘化钾淀粉试纸显蓝色。

 4．芳香第一胺反应  此反应又称重氮化-偶合反应，用于鉴别芳香第一胺(即芳伯氨)，收载于《中国药典》附录“一般鉴别试验”项下。盐酸普鲁卡因具有芳伯氨基，在盐酸介质中与亚硝酸钠作用，生成重氮盐，重氮化盐进一步与β-萘酚偶合，生成有色偶氮合物。

   方法：取供试品约50mg，加稀盐酸1ml，必要时缓缓煮沸使溶解，放冷，加0.1mol／L亚硝酸钠溶液数滴，滴加碱性β-萘酚试液数滴，生成橙色或猩红色的沉淀。

(二)检查

 盐酸普鲁卡因的杂质检查项目有：酸度、溶液的澄清度、对氨基苯甲酸、干燥失重、炽灼残渣、铁盐及重金属。

(三)含量测定

 盐酸普鲁卡因分子结构中含有芳香伯胺，《中国药典》采用亚硝酸钠滴定法进行含量测定，用永停法指示终点。

    方法：取本品约0.6g，精密称定，照永停滴定法，在15℃～25℃，用亚硝酸钠滴定液(0.1mol／L)滴定。每1ml亚硝酸钠滴定液(0.1mol／L)相当于27.28mg的盐酸普鲁卡因(C13H20N2O2·HCl)。

 滴定原理同芳香第一胺的鉴别项下。由重氮化反应可知，1mol的亚硝酸钠相当于1mol的盐酸普鲁卡因，盐酸普鲁卡因的分子量为272.77，所以滴定度为  

T=0.1×272.77=27.28(mg)

 式中，V为消耗滴定液的体积(ml)；T为滴定度；W为供试品的称样量(g)；F为滴定液的浓度校正因数，F=滴定液的实际浓度／滴定液的规定浓度。

二、盐酸普鲁卡因注射液的分析

(一)对氨基苯甲酸的检查

 盐酸普鲁卡因注射液在制备的过程中，受灭菌温度、时间等因素的影响，酯结构水解生成对氨基苯甲酸和二乙氨基乙醇。对氨基苯甲酸随贮存时间的延长或受热，还可能进一步脱羧转化为苯胺，进而被氧化为有色物使注射液变黄、疗效下降、毒性增加。因此，《中国药典》规定，采用高效液相色谱法检查盐酸普鲁卡因注射液中的对氨基苯甲酸。

    方法：取装量差异项下的内容物适量，精密称定，加水溶解并定量稀释制成每lml中含盐酸普鲁卡因0.2mg的溶液，作为供试品溶液；取对氨基苯甲酸对照品，精密称定，加水溶解并定量稀释制成每lml中含对氨基苯甲酸lμg的溶液，作为对照品溶液。照盐酸普鲁卡因中对氨基苯甲酸项下的方法测定，供试品溶液的色谱图中如有与对氨基苯甲酸峰保留时间一致的色谱峰，按外标法以峰面积计算，不得过盐酸普鲁卡因标示量的0.5%。

  (二)含量测定

盐酸普鲁卡因注射液的含量测定方法采用高效液相色谱法。

 色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以含0.1%庚烷磺酸钠的0.05mol／L磷酸二氢钾溶液（用磷酸调节pH值至3.0)-甲醇（68:32)为流动相；检测波长为290mn，理论板数按普鲁卡因峰计算不低于2000。普鲁卡因峰与相邻杂质峰的分离度应符合要求。

 测定法：精密量取本品适量，用水定量稀释制成每lml中含盐酸普鲁卡因0.02mg的溶液，作为供试品溶液，精密量取10μl注入液相色谱仪，记录色谱图；另取盐酸普鲁卡因对照品，精密称定，加水溶解并定量稀释制成每lml中含盐酸普鲁卡因0.02mg的溶液，同法测定。按外标法以峰面积计算，即得。