脊椎动物标本制作
(二)浸制解剖标本
摘要:
脊椎动物的种类繁多,其体形大小、器官构造等均有很大差异,因此,需要根据不同的要求,采用不同的方法,制作成各种不同类型的标本,以满足教学和科研等方面的需要。
浸制标本是脊椎动物标本中的一种主要类型,在教学上应用很广。它主要适用于鱼类、爬行类和两栖类的整体和内部器官以及局部标本的保存。鸟、兽的外部形态标本,一般不采用浸制方法,宜采用剥制方法处理。
浸制标本是利用防腐固定液的固定作用,防止动物体的腐烂变质,以达到长期保存的目的。
由于教学要求和标本处理方法的不同,浸制标本可分为下列几种类型:
1. 整体浸制标本
整个动物体,不需要解剖,按原来的外部形态整理好姿态,直接浸渍在固定液中保存。主要适用于鱼类、两栖类和爬行类。
2. 胚胎发育标本
按照动物不同的胚胎发育阶段,顺序排列成整个发育过程的生活史,以显示其发育过程的变化。例如蛙的晚期胚胎发育过程等。
3. 内脏器官解剖标本
根据需要,将动物体解剖,以显示内部各系统、器官的构造。例如,血液循环系统、神经系统或显示整体主要器官的解剖标本等。
4. 比较解剖标本
解剖各纲代表动物相应的系统、器官,按顺序进行排列,以显示它们的演化过程和亲缘关系.例如各纲动物脑神经比较和心脏比较等。
用作浸制标本的动物体,必须用药剂配制成适当浓度的固定液固定和浸渍,以防动物体腐烂变质。同时,用作标本材料的动物体,还需经过整理或解剖等工序。例如血管注射标本,为了显示血管的分布位置,需要在血管中注射入适当的色剂。一般须将标本材料保存在适当规格的标本瓶或标本缸中,因此体形大的种类,往往受到一定的限制,在选择材料时应加以注意。
-、常用的器具和材料
(1)解剖工具 包括解剖刀、直头镊、弯头镊、长镊、剪刀、血管钳、解剖针和解剖蜡盘等。
(2)注射器具 包括5~20毫升规格的注射器和6~8号注射针头,用作注射血管标本。
(3)玻璃刀 作划标本瓶中固定标本的玻璃片用。
(4)量筒或量杯 用作配制固定液。
(5)搪瓷盘和塑料盘 用作固定、浸渍标本材料(塑料盘可用市售食品周转箱代替,高度宜在15厘米左右)。
(6)搪瓷杯(或烧杯) 盛放注射色液。
(7)标本瓶和标本缸 用作固定、保存标本。
(8)煤气灯、电炉、煤油炉 用作注射色液的加温。
(9)水浴锅(或小铝锅) 用作注射色液的加温。
(10)玻璃棒 搅拌注射液等。
(11)小塑料桶 盛放温水,洗涤注射器和针头。
(12)研钵 研磨颜料。
(13)纱布和脱脂棉 用作野外采集装运时包裹标本。
(14)小冰块 用作冷凝血管注射液。可用大口保温瓶保存。
此外,还需备有一些针、线、玻璃片等。
二、药品、颜料及其应用
(1)福尔马林(CH2O) 是甲醛水溶液的商品名。为无色、有毒和有刺激性气味的液体。市售的福尔马林含甲醛37~40%,具强烈的杀菌能力,能在较短的时间内杀灭细菌的芽抱,且渗透力强,防腐性能好,固定速度快。但经过福尔马林固定的材料,有少许膨涨现象。如果浓度过高,标本材料容易硬化。因此,对于要求较为精细的解剖材料,不宣单独采用福尔马林液固定保存,而需要与酒精、甘油按适当比例混合使用,以纠正福尔马林的膨涨作用。福尔马林价格低廉,使用范围很广,是脊椎动物最常用的固定保存液。使用时,一般浓度约为5~10%(以市售福尔马林为100%计算)。
(2)酒精(乙醇)有强烈的杀菌能力,渗透力强,有脱水作用,是一种良好的固定保存液。浓度一般在70~75%为宜。浓度越高,杀菌能力反而降低。其缺点是易使材料产生收缩。因此,在固定时,应从低浓度开始,逐渐转入高浓度。由于酒精价格较高,一般浸制标本不单独使用,而是和福尔马林等混合后使用,这样既可降低成本,又可收到良好的效果。配制固定液,一般使用95%的酒精进行配制。
(3)甘油(丙三醇) 用作配制固定液和保色剂。
(4)苯酚(石炭酸) 用作配制固定液和防腐剂。
(5)麝香草酚 用作防霉剂。
(6)乙醚、氯仿 用作动物麻醉剂。
(7)盐酸 用作配制脱钙剂。
(8)冰醋酸 用作配制固定液。
(9)乙二醇(甘醇) 配制固定液时,用作防冻剂。
(10)苦味酸(2、4、6-三硝基苯酚) 黄色晶体,易爆药品,用作配制固定液。
(11)明胶(动物胶) 配制注射色液的填充剂,呈粒状或片状。
(12)淀粉用作配制注射色液的填充剂。
(13)颜料用作配制血管注射标本的色液。
动脉用红色料:银朱(硫化汞,HgS)、洋红或5203红。
静脉用蓝色料:琼蓝、普鲁士蓝或钛青蓝。
肝门静脉用黄色料:铅黄(铅铬黄)。
三、各种溶液的配制
1. 固定保存液的配制和选择
(1)配方一 适用于一般整体标本材料的固定和保存,应用范围最广。
成分:福尔马林10毫升,水90毫升。
(2)配方二 适用于解剖浸制标本的固定和保存。
成分:福尔马林50毫升,酒精50毫升,甘油少量。
(3)配方三 适用于标本的保存。有防冻作用,宜于冬季野外采集使用。
成分:福尔马林10毫升,乙二醇30毫升,水60毫升。
(4)配方四 即Bouin氏固定液,适用于文昌鱼、蛙胚胎整体或切片材料的固定。固定时间为24小时左右,也可在此液中长期保存。固定后,可直接移入70%酒精中彻底洗净,直到无黄色为止。
成分:苦味酸饱和水溶液75毫升,福尔马林25毫升,冰醋酸5毫升。
2. 注射色液的配制
注射色液作血管注射标本充填血管用,注射色液是用颜料、药品和填充剂配制而成,其成分比例和配制方法很多,这里仅将常用的两种注射色液的配制方法和成分比例介绍如下:
(1)配方一 明胶填充剂注射色液的配制
成分:明胶20~25克,颜料(红或蓝)3~5克,水100毫升。
配制方法:先将动物胶(片状胶应先将其粉碎成小片)按比例加水浸泡3~4小时,充分软化后,放入水浴锅中隔水加热,直至明胶充分融解。色料(红或蓝)用研钵研成细粉末后加入,并用玻璃棒搅拌片刻,直至色胶调匀,用两层纱布过滤后,即可使用。
在常温情况下,明胶注射色液的浓度应保持冻胶状态,但浓度不宜过高,否则注射时极易凝结,而且推动注射器也很费力。在使用过程中,必须始终隔水加温,保持冻胶融解状态。同时,被注射的动物体,尽可能在其体温尚未散失时进行,避免注射液在注射过程中遇冷产生凝结现象,从而影响标本注射的顺利进行,甚至因血管受阻塞而造成血管破裂,以致无法继续进行注射。在冬天注射时,可将动物体浸泡在温水中约10~20分钟。
明胶注射色液的优点是注射较容易,在解剖血管时,如果不慎损伤血管,注射色液也不致外流,而且可利用明胶进行粘接。因此,目前大多数都是采用这种注射色液进行注射。其缺点是注射器具和注射色液都需要加温,同时在冬季注射时,由于气温过低,注射时比较容易凝结。因此,在气温较低的情况下,应适当降低明胶的含量,但必须适度。
如果注射色液没有用完,可加入少许麝香草酚,避免注射色液霉烂变质。
(2)配方二 淀粉填充剂注射色液的配制
成分:淀粉75克,福尔马林20毫升,色料7~10克,水100毫升。
配制方法:按比例将淀粉和色料混合,置于研钵中进行研磨,使其充分混合,立即加水少许,继续不断研磨成浆糊状后,把水和福尔马林按比例全部加入,用玻璃棒搅拌均匀,再用三层纱布过滤入具盖的容器中,过滤时,用玻璃棒不断搅拌,避免沉积在纱布上,然后按比例加入甘油即成。
这种注射色液的优点是,不必加温,可长期使用。其缺点是,极易堵塞针头,往往影响注射的顺利进行。同时,在解剖血管时,如果不慎损伤血管,就会使部分注射液流失,以致看不清血管,其效果不如明胶注射色液。
3. 脱钙剂的配制
用于制作神经系统标本时脱除骨骼的钙质,使骨骼软化。
成分:盐酸(工业用)10~15毫升,福尔马林2毫升,水83~88毫升。
参考文献:

唐子英等著.脊椎动物标本制作.复旦大学出版社,1985.

