一、核酸的分离、提取通则 

为了得到完整的大分子核酸，一般要注意3点 ：

1．保持低温（0º～4℃）。

2．防止过酸、过碱，避免剧烈搅拌。

3．防止核酸酶的作用。 

例：猪肝组织中核酸的分离、鉴定？

二、大分子DNA的提取 

1．材料的选择 

2．细胞破碎 

3．DNA-蛋白质（DNP）的提取 

4．去蛋白质 

（1）SDS 

（2）苯酚法 

（3）氯仿法 

（4）酚:氯仿:异戊醇＝25:24:1 

5．沉淀DNA 

6．去杂质 

（1）去RNA 

（2）去多糖 

7．进一步纯化 

三、RNA的提取 

1．不同种类RNA的提取 

2．大分子RNA的提取 

（1）酚提取 

（2）酚-氯仿-SDS法 

3．mRNA的提取 

抑制DNase：可加柠檬酸钠、EDTA等金属螯合剂；或加去污剂  十二烷基硫酸钠（SDS）；或加蛋白变性剂。 

抑制RNase： 

（1）实验器皿高温，或高压灭菌，不能高压灭菌的用 具用0.1%二乙基焦碳酸盐（diethyl pyrocarbonate, DEPC）处理。 

（2）加强的蛋白变性剂如硫氰酸胍、异硫氰酸胍等。

（3）加核糖核酸酶阻抑蛋白（RNasin）等RNase的抑制剂。

四、核酸纯度鉴定 

五、核酸含量的测定 

六、核酸一级结构的测定 

1.化学裂解法：标、切、分、染、读 

2.酶解法(测RNA)：标、切、分、染、读 

3.合成终止法：标、合、分、染、读 

Sanger测定DNA核苷酸序列的方法：DNA合成终止法（双脱氧DNA链合成终止法）。