蛋白质的分离纯化
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分离纯化蛋白质的意义
1.研究蛋白质的结构与功能:
要求纯度高,不变性;
2.提取活性的酶或蛋白质:
必须保持天然活性状态;
3.作为药物或食品添加剂:
纯度要求一般。
蛋白质提纯的总目标:
增加制品纯度或比活力,设法除去变性的蛋白质和其他杂蛋白,且希望所得的蛋白质的产量达到最高值。
蛋白质分离纯化的一般程序

分离纯化的方法

根据分子量大小不同的分离纯化方法


密度梯度离心

层析
层析也称之色谱,基本原理是分析样品作为流动相流过固相时,由于样品中的各个成分与固相相互作用不同使得样品中的各个成分通过固相的速率产生了差别,从而达到分离样品中各个成分的目的。
层析因固相介质不同又分为离子交换层析、分子筛层析和吸附层析等各种层析。
将作为固相成分的不溶性基质,例如葡聚糖凝胶、纤维素、树脂等填充到柱子中,用平衡液平衡。
然后加样品,再用适当的溶剂洗脱。
样品中各种成分通过柱子取决于与固相成分的相互作用,最后以不同速率被洗脱出来,达到将各个成分分离的目的。

