一、RNA聚合酶（DDRP）

1. 原核生物的RNA聚合酶

E.coli的RNA聚合酶是由四种亚基组成的五聚体（）

RNA聚合酶全酶及核心酶电泳图谱 

 E. coli RNA聚合酶组分及功能

其他原核生物的RNA聚合酶，在结构、组成、功能上均与E.coli相似。

原核生物的 RNA聚合酶都受一类抗结核药利福平或利福霉素的特异性抑制。这类药物能与RNA聚合酶的亚基特异结合，从而影响酶的活性。

RNA聚合酶所催化的反应

（一）转录模板

双链DNA分子中能作为模板转录出RNA的那条链，称为模板链。又叫反意义链（antisense strand）或Watson链。

另一条互补链称为编码链，又叫有意义链（sense strand） 或 Crick链。

转录产物RNA的碱基序列，除了 T 变U 外，其余与编码链相同。

不对称转录(asymmetric transcription)

＆在DNA分子双链上某一区段，一股链可转录，另一股链不转录；

＆模板链并非永远在同一单链上。

（二）启动子

DNA上的RNA聚合酶识别、结合和开始转录的一段序列，称为启动子，有序列保守性 。

启动子的结构 ：识别部位、 结合部位、转录起始点 

转录起点

是指与新生RNA链第一个核苷酸相对应DNA链上的碱基，研究证实通常为一个嘌呤。常把起点前面，即5‘末端的序列称为上游(upstream)，而把其后面即3’末端的序列称为下游(downstream)。在描述碱基的位置时，一般用数字表示，起点为+1，下游方向依次为+2、+3……，上游方向依次为-1、-2、-3……。

原核生物启动子

－35区：一致性序列为TTGACA

是RNA-pol的识别位点

－10区：一致性序列为TATAAT

又叫Pribnow盒

是RNA-pol的结合位点

三、转录过程

分为三个阶段：

起始(initiation)

延长(elongation)

终止(termination)

（一）转录起始

1. RNA聚合酶结合在转录模板的起始区域。

2. DNA双链解开，以一条链为模板，合成第一个磷酸二酯键。

转录起始过程

1. RNA聚合酶全酶(a2bb¢s)与模板结合。          

2. DNA双链解开。

3. 在RNA聚合酶作用下发生第一次聚合反应，形成转录起始复合物。

转录起始复合物

（二）转录延长

1. 亚基脱落，RNA–pol聚合酶核心酶变构，与模板结合松弛，沿着DNA模板前移；

2. 在核心酶作用下，NTP不断聚合，RNA链不断延长。

转录泡（transcription bubble）：

在转录延长过程中，由局部打开的DNA双链、RNA聚合酶核心酶及新生成的RNA三者结合在一起的复合体，为空泡状结构，又称转录复合物。

（三）转录终止

RNA聚合酶在DNA模板上停顿下来，转录产物RNA链从转录复合物上脱落下来。 

分类：　　

□ 依赖Rho (ρ)因子的转录终止

□ 非依赖Rho因子的转录终止

1.依赖ρ因子的转录终止

□ 因子是同六聚体蛋白；

□ 因子能结合RNA，与poly C的结合力最强；

□ 因子还有ATP酶和解螺旋酶的活性。

2. 不依赖ρ因子的转录终止

DNA模板上靠近终止处，有特殊的碱基序列，转录出RNA后，RNA产物形成特殊的结构来终止转录。

茎环结构使转录终止的机理

● 使RNA聚合酶变构，转录停顿；

● 使转录复合物趋于解离，RNA产物释放。