实验一 血涂片的制备与显微镜检查

学习目标

学会生物显微镜使用操作方法和血涂片的制备方法

掌握血液涂片的下血细胞形态、种类

能够熟练判定血液涂片的质量。

学习要求

教学重点：生物显微镜的使用操作和血液涂片制备方法

教学难点：准确调整显微镜的清晰度、血液在载玻片上涂片均匀度和染色质量。

注意事项

1.注意无菌操作， 防止交叉感染。

2.玻片等均应严格标记。 新购置的载玻片常带有游离碱质，必须用约 lmol/L HCl 浸泡24小时后，再用清水彻底冲洗，擦 干后备用。 

3.血涂片应呈舌状，头、 体、 尾三部分清晰

4.推好的血涂片在空气中晃动，使其尽快干燥。

5. 涂片的厚薄、 长度与血滴的大小、 推片与载玻片之间的角度、 推片时的速度及血细胞比容有关。

实验操作

1.每人2张载玻片，取一张干净载玻片，轻轻接触血滴，将1滴血滴附着在载玻片右端。载玻片不能接触采血部位的皮肤。

2.另取一边缘光滑平齐的玻片作为推片，推片与载片约成30～45°，由前向后与血滴接触，使血滴在玻片边缘散开，迅速将玻片推向左方，作成一均匀和厚度适中的血涂片。

3.将瑞特氏染液（伊红-亚甲基蓝）滴在血膜上，染液淹没整个血膜，染半分钟。加等量蒸馏水与染液混合，再染5min。最后用蒸馏水把染液冲掉，用吸水纸吸干，自然干燥后，即可观察。

4.观察： 选一厚薄适宜部位置于显微镜下观察。先用低倍镜观察全片，了解涂片染色、细胞分布情况，再用油镜观察红细胞、白细胞（中性粒细胞、嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞、淋巴细胞、单核细胞）、血小板的大小及形态。

5.学生用一张实验报告纸，用铅笔记录描绘5个视野中血细胞形态，包括红细胞、白细胞（中性粒细胞、嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞、淋巴细胞、单核细胞）、血小板的形态。