实验试剂

PMSG、 HCG、 BSA、生理盐水、石蜡油、透明质酸酶、

实验仪器

眼科剪、镊子、注射器、移卵针、培养皿、移液器、Tip头、 解剖镜、 倒置显微镜

操作步骤

MII期卵子的获取： 用10IU PMSG腹腔注射6-8周龄雌鼠，48h后再用10IU HCG腹腔注射，接着15-16h后断颈法处死雌鼠，剖开腹腔，将输卵管取出放入滴有150μL/滴HTF培养液的皿中。将有输卵管的皿放在解剖镜下观察，用两个1mL注射器针头配合切开输卵管壶腹部，释放COC（卵丘-卵母细胞复合体），用灭菌的宽径枪头将COC吸入准备好的卵子受精滴中或一个新的HTF培养液滴中，每200μL滴加2μL透明质酸酶，用枪轻轻吹打，当颗粒细胞消化一半的时候开始移卵，用HTF培养液洗卵3遍后，将卵移入事先准备好的卵子受精滴中。