目录

  • 1 第一章 绪论
    • 1.1 基因工程的概念
    • 1.2 基因工程研究发展史
    • 1.3 基因工程主要的研究内容
    • 1.4 基因工程的操作程序、意义与发展前景
  • 2 第二章 核酸基本操作技术
    • 2.1 核酸的提取
    • 2.2 核酸的检测与保存
    • 2.3 核酸的凝胶电泳
    • 2.4 核酸分子杂交技术
  • 3 第三章 基因工程工具酶
    • 3.1 限制性核酸内切酶
    • 3.2 DNA连接酶
    • 3.3 DNA聚合酶
    • 3.4 核酸酶
    • 3.5 核酸修饰酶
  • 4 第四章 基因工程载体
    • 4.1 质粒载体
    • 4.2 噬菌体载体
  • 5 第五章 目的基因的获得
    • 5.1 基因文库法获得目的基因
    • 5.2 化学合成法与PCR法获得目的基因
  • 6 第六章  DNA体外重组与基因转移
    • 6.1 重组DNA分子的构建
    • 6.2 重组体导入受体细胞
  • 7 第七章 重组子的筛选和鉴定
    • 7.1 遗传学检测法
    • 7.2 核酸分子杂交检测法
    • 7.3 物理检测法-电泳检测法
    • 7.4 免疫化学检测法
    • 7.5 DNA序列分析法和转译筛选法
    • 7.6 真核生物基因重组筛选方法
  • 8 第八章  外源基因的表达
    • 8.1 外源基因在原核细胞中的表达
    • 8.2 外源基因在真核细胞中的表达
  • 9 第九章 微生物基因工程
    • 9.1 细菌基因工程
    • 9.2 酵母菌基因工程
    • 9.3 微生物基因工程的应用
  • 10 第十章 植物基因工程
    • 10.1 植物基因工程的载体系统及转化方法
    • 10.2 外源基因的表达与检测及植物基因工程的应用
  • 11 第十一章 动物基因工程
    • 11.1 转基因动物的制备
    • 11.2 转基因动物的应用
基因工程的操作程序、意义与发展前景
  • 1 讲义
  • 2 课件

                基因工程技术的操作程序

(1)从供体生物的基因组中分离出目的基因DNA片段(简称); 

(2)用限制性核酸内切酶分别将外源DNA和载体分子切开(简称);

(3)用DNA连接酶将含有外源基因的DNA片断接到载体上,形成DNA重组分子(简称);

(4)借助于细胞转化手段将DNA重组分子导入受体细胞中(简称);

(5)短时间培养转化细胞,以扩增DNA重组分子或使其整合到受体细胞的基因组中(简称);

(6)筛选和鉴定转化细胞,获得使外源基因高效表达的基因工程菌或细胞(简称

(7)将选出的细胞克隆的目的基因进一步研究分析,并设法使之实现功能蛋白的表达。

                 基因工程的意义与发展前景

(一)基因工程研究的意义:

1、大规模生产生物分子

2、设计构建新物种

3、搜寻、分离和鉴定生物体尤其是人体内的遗传信息资源

(二)基因工程存在的问题及发展前景

主要问题:安全性问题。科学技术是一把双刃剑,它可以造福于人类,也可以给人类带来灾难,最主要的问题是安全性问题:

1、筛选的标记或报告基因是否会对人及动物有害?

2、抗除草剂基因会不会使转基因植物变成不可控制的杂草?

3、转基因动物是否会演变成对人类有威胁的新物种?

虽然有这样那样的担心,但是大量的实践表明,这样的问题出现的可能性非常小,而且基因工程具有很大的优势,如前所述,它不但可以进行种间、属间科间遗传物质交流,还可以进行高等、低等,动物与植物间遗传物质交流,同时可以定向而不改变原来的优良性状,所以十分诱人。因此总体来说基因工程技术具有巨大的活力,发展前景非常广阔。