目录

  • 1 第一章 绪论
    • 1.1 基因工程的概念
    • 1.2 基因工程研究发展史
    • 1.3 基因工程主要的研究内容
    • 1.4 基因工程的操作程序、意义与发展前景
  • 2 第二章 核酸基本操作技术
    • 2.1 核酸的提取
    • 2.2 核酸的检测与保存
    • 2.3 核酸的凝胶电泳
    • 2.4 核酸分子杂交技术
  • 3 第三章 基因工程工具酶
    • 3.1 限制性核酸内切酶
    • 3.2 DNA连接酶
    • 3.3 DNA聚合酶
    • 3.4 核酸酶
    • 3.5 核酸修饰酶
  • 4 第四章 基因工程载体
    • 4.1 质粒载体
    • 4.2 噬菌体载体
  • 5 第五章 目的基因的获得
    • 5.1 基因文库法获得目的基因
    • 5.2 化学合成法与PCR法获得目的基因
  • 6 第六章  DNA体外重组与基因转移
    • 6.1 重组DNA分子的构建
    • 6.2 重组体导入受体细胞
  • 7 第七章 重组子的筛选和鉴定
    • 7.1 遗传学检测法
    • 7.2 核酸分子杂交检测法
    • 7.3 物理检测法-电泳检测法
    • 7.4 免疫化学检测法
    • 7.5 DNA序列分析法和转译筛选法
    • 7.6 真核生物基因重组筛选方法
  • 8 第八章  外源基因的表达
    • 8.1 外源基因在原核细胞中的表达
    • 8.2 外源基因在真核细胞中的表达
  • 9 第九章 微生物基因工程
    • 9.1 细菌基因工程
    • 9.2 酵母菌基因工程
    • 9.3 微生物基因工程的应用
  • 10 第十章 植物基因工程
    • 10.1 植物基因工程的载体系统及转化方法
    • 10.2 外源基因的表达与检测及植物基因工程的应用
  • 11 第十一章 动物基因工程
    • 11.1 转基因动物的制备
    • 11.2 转基因动物的应用
基因工程主要的研究内容
  • 1 讲义
  • 2 课件

                         基因工程研究的内容

(一)基因工程工具酶的研究:

基因工程工具酶是指体外合成、切割、修饰和连接等系列过程中所需要的酶,包括DNA聚合酶(合成DNA片断及探针)、限制性核酸内切酶(上千种)、DNA修饰酶(末端转移酶、碱性磷酸化酶、甲基化酶等)、DNA连接酶(大肠杆菌连接酶和T4DNA连接酶)等

(二)基因工程载体的研究

载体在基因工程中占有十分重要地位,目的基因能否有效导入受体细胞,并在其中维持和表达,在很大程度上取决于载体。

    最早发现和构建的是原核生物载体,后来才发现Ti 质粒载体及动物病毒载体。构建新的载体仍是基因工程研究的重要内容

(三)受体系统的研究

用作基因工程的受体可分为两类:

1、原核生物受体:大肠杆菌、沙门氏菌、卡介苗等

2、真核生物受体:酵母菌、植物(愈伤组织、细胞、原生质体等)、动物(生殖细胞、胚胎干细胞和体细胞)

(四)目的基因的研究

目的基因就是特殊需要的基因。具优良性状的,致病基

因都可作为目的基因。现在已获得的目的基因大致可分为三类:与医药相关的基因(如IFN基因);抗病、虫害和恶劣环境基因(如保护性抗原基因);编码特殊蛋白或多肽的基因(如生长激素基因等)。目的基因可通过构建基因文库、PCR法及化学合成等方法获取。

(五)生物基因组学研究

人类基因组计划、水稻基因组计划、家猪基因组计划等

(六)应用研究

1、在医学上的应用:基因工程被用于大量生产过去难以得到或几乎不可能得到的蛋白质-肽类药物。

(1)用转基因植物或动物生产药物;(2)用微生物生产药物;(3)技术设计高效高特异性的生物制剂;(4)研制疫苗;(5)基因诊断;(6)法医鉴定;(7)基因治疗。

2、基因工程在农业生产中的应用

(1)提高植物的光合作用效率

①提高CO2的固定率:改变与光合作用有关的酶的结构和组成(如1′5-二磷酸核酮糖羧化酶,增强该酶的活性,增强其在卡尔文循环中催化CO2的固定)。

②提高光能吸收率和转化率:改变光能交换系统的分子的基因结构。

(2)提高豆科植物的固氮效率:使非固氮植物转变为固氮植物或能与根瘤菌共生固氮。

(3)转基因植物:将外源基因导入植物细胞,经组织培养,获得能够表达外源基因的植物称为转基因植物。可增加一些优质性状(高产、稳定、优质、抗虫、抗病等)。

(4)转基因动物

3、在环保方面的应用

(1)检测水污染:重组细菌或转基因鱼等检测水污染

(2)生物降解:用带有重组质粒(降解质粒)的超级菌分解油(烷烃类)、有机农药污染。

4、基因工程在其他方面的应用

酶制剂工业(蛋白酶、淀粉酶和植酸酶等均可以用大肠杆菌生产)

食品工业(谷氨酸、调味剂和油类等):

克隆各种参与纤维素降解的酶的基因,导入酿酒酵母,利用廉价的纤维素来生产葡萄糖,发酵成酒。

 用外源基因改造酿酒酵母,产生优质的啤酒。