目录

  • 1 醋酸菌的分离鉴定与诱变育种实验
    • 1.1 醋酸菌的分离鉴定简介
    • 1.2 细菌分离鉴定实验
    • 1.3 诱变育种原理
    • 1.4 紫外诱变育种实验
    • 1.5 【拓展】细菌突变株的基因组测序分析
  • 2 基于16S rRNA基因测序的细菌分类鉴定
    • 2.1 细菌分类鉴定原理
    • 2.2 ABI3730上机测序视频
    • 2.3 16S rRNA基因测序分析
    • 2.4 利用MEGA构建进化树
    • 2.5 【拓展】微生物多样性分析虚拟仿真实验
      • 2.5.1 微生物组原理与方法
  • 3 绿色荧光蛋白(GFP)的基因定点突变实验
    • 3.1 基因定点突变原理
    • 3.2 PCR定点突变实验
    • 3.3 荧光蛋白艺术平板创作
    • 3.4 混合式教学实验案例
    • 3.5 【拓展】CRISPR/Cas9基因编辑实验
  • 4 高产谷胱甘肽酵母菌株的选育实验
    • 4.1 GSH实验原理
    • 4.2 酵母菌的分离鉴定
    • 4.3 谷胱甘肽提取与测定
    • 4.4 实验数据处理
    • 4.5 【拓展】酵母菌育种开放性实验
      • 4.5.1 实验设计的要求
  • 5 附录
    • 5.1 实验报告的写作
    • 5.2 移液枪使用方法
    • 5.3 实验室注意事项
移液枪使用方法

移液枪的使用方法

移液枪有两种类型的结构,不过经常用的就是下面的这种类型的移液枪,空气垫加样器,外观结构见下图:


(1)量程的调节:

在调节量程时,用拇指和食指旋转取液器上部的旋钮,如果要从大体积调为小体积,则按照正常的调节方法,逆时针旋转旋钮即可;但如果要从小体积调为大体积时,则可先顺时针旋转刻度旋钮至超过量程的刻度,再回调至设定体积,这样可以保证量取的最高精确度。在该过程中,千万不要将按钮旋出量程,否则会卡住内部机械装置而损坏了移液枪。

(2)枪头的装配:

在将枪头(pipette tips)套上移液枪时,很多人会使劲地在枪头盒子上敲几下,这时错误的做法,因为这样会导致移液枪的内部配件(如弹簧)因敲击产生的瞬时撞击力而变得松散,甚至会导致刻度调节旋钮卡住。正确的方法是将移液枪(器)垂直插入枪头中,稍微用力左右微微转动即可使其紧密结合。
(3)移液的方法:

移液之前,要保证移液枪、枪头和液体处于相同温度。吸取液体时,四指并拢握住移液枪上部,用拇指按住柱塞杆顶端的按钮,移液枪保持竖直状态,将枪头插入液面下2-3毫米,缓慢松开按钮,吸上液体,并停留1~2秒钟(粘性大的溶液可加长停留时间),将吸头沿器壁滑出容器,排液时吸头接触倾斜的器壁。在吸液之前,可以先吸放几次液体以润湿吸液嘴(尤其是要吸取粘稠或密度与水不同的液体时)。最后按下除吸头推杆,将吸头推入废物缸。

  

(4)移液枪的正确放置
  使用完毕,移液器调回更大量程。可以将其竖直挂在移液枪架上,但要小心别掉下来。当移液枪枪头里有液体时,切勿将移液枪水平放置或倒置,以免液体倒流腐蚀活塞弹簧。


移液器使用注意事项
1、吸取液体时一定要缓慢平稳地松开拇指,绝不允许突然松开,以防将溶液吸入过快而冲入移液枪内腐蚀柱塞而造成漏气。
2、为获得较高的精度,吸头需预先吸取一次样品溶液,然后再正式移液,因为吸取血清蛋白质溶液或有机溶剂时,吸头内壁会残留一层“液膜”,造成排液量偏小而产生误差。
3、移液器反复撞击吸头来上紧的方法是非常不可取的,长期操作会使内部零件松散而损坏移液器。
4、移液器未装吸头时,切莫移液。
5、移液器严禁吸取有强挥发性、强腐蚀性的液体(如浓酸、浓碱、有机物等)。
6、严禁使用移液器吹打混匀液体。
7、不要用大量程的移液器移取小体积的液体,以免影响准确度。同时,如果需要移取量程范围以外较大量的液体,请使用移液管进行操作。
8、使用时要检查是否有漏液现象。
方法:吸取液体后悬空垂直放置几秒中,看看液面是否下降。
如果漏液,原因大致有一下几方面:
8.1 枪头是否匹配;
8.2 弹簧活塞是否正常;
8.3如果是易挥发的液体(许多有机溶剂都如此),则可能是饱和蒸汽压的问题。可以先吸放几次液体,然后再移液。