生物化学与分子生物学

罗洪斌、黄胜、刘绪、刘国强、张宏、黄发军、吴静、张继承、李丹

目录

  • 1 绪论
    • 1.1 第一节 生物化学发展简史
      • 1.1.1 一、叙述生物化学阶段
      • 1.1.2 二、动态生物化学阶段
      • 1.1.3 三、分子生物学时期
      • 1.1.4 四、我国科学家对生物化学发展的贡献
    • 1.2 第二节 当代生物化学研究的主要内容
    • 1.3 第三节 生物化学与医学
    • 1.4 章节测试
  • 2 第一篇 生物分子的结构与功能
    • 2.1 第一章  蛋白质的结构与功能
      • 2.1.1 第一节 蛋白质的分子组成
        • 2.1.1.1 一、组成人体蛋白质的20种氨基酸均属于L-α-氨基酸
        • 2.1.1.2 二、氨基酸可根据侧链接构和理化性质进行分类
        • 2.1.1.3 三、20种氨基酸具有共同或特异的理化性质
        • 2.1.1.4 四、氨基酸通过肽键连接而形成蛋白质或活性肽
        • 2.1.1.5 五、生物活性肽具有生理活性及多样性
        • 2.1.1.6 六、闯关习题
      • 2.1.2 第二节 蛋白质的分子结构
        • 2.1.2.1 一、氨基酸的排列顺序决定蛋白质的一级结构
        • 2.1.2.2 二、多肽链的局部主链构象为蛋白质二级结构
        • 2.1.2.3 三、多肽链进一步折叠形成蛋白质三级结构
        • 2.1.2.4 四、含有两条以上多肽链的蛋白质具有四级结构
        • 2.1.2.5 五、蛋白质可依其组成、结构或功能进行分类
        • 2.1.2.6 六、闯关习题
      • 2.1.3 第三节 蛋白质结构与功能的关系
        • 2.1.3.1 一、蛋白质的主要功能
        • 2.1.3.2 二、蛋白质执行功能的主要方式
        • 2.1.3.3 三、蛋白质一级结构是高级结构与功能的基础
        • 2.1.3.4 四、蛋白质的功能依赖特定空间结构
        • 2.1.3.5 五、闯关习题
      • 2.1.4 第四节 蛋白质的理化性质
        • 2.1.4.1 一、蛋白质具有两性电离性质
        • 2.1.4.2 二、蛋白质具有胶体性质
        • 2.1.4.3 三、蛋白质空间结构破坏而变性
        • 2.1.4.4 四、蛋白质在紫外光谱区有特征性吸收峰
        • 2.1.4.5 五、应用蛋白质呈色反应可测定蛋白质溶液含量
        • 2.1.4.6 六、闯关习题
      • 2.1.5 小结与习题
    • 2.2 第二章 核酸的结构与功能
      • 2.2.1 第一节 核酸的化学组成及一级结构
        • 2.2.1.1 一、核苷酸是构成核酸的基本组成单位
        • 2.2.1.2 二、DNA是脱氧核苷酸通过3´，5´-磷酸二酯键连接形成的大分子
        • 2.2.1.3 三、RNA也是具有3´，5´-磷酸二酯键的线性大分子
        • 2.2.1.4 四、核酸的一级结构是核苷酸的排列顺序
        • 2.2.1.5 五、闯关习题
      • 2.2.2 第二节 DNA的空间结构与功能
        • 2.2.2.1 一、DNA的二级结构是双螺旋结构
        • 2.2.2.2 二、DNA经过盘绕折叠形成致密的高级结构
        • 2.2.2.3 三、DNA是遗传信息的物质基础
        • 2.2.2.4 四、闯关习题
      • 2.2.3 第三节 RNA的结构与功能
        • 2.2.3.1 一、mRNA是蛋白质合成的模板
        • 2.2.3.2 二、tRNA是蛋白质合成的氨基酸载体
        • 2.2.3.3 三、以rRNA为组分的核糖体是蛋白质合成的场所
        • 2.2.3.4 四、组成型非编码RNA是保障遗传信息传递的关键因子
        • 2.2.3.5 五、调控型非编码RNA参与了基因表达的调控
        • 2.2.3.6 六、闯关习题
      • 2.2.4 第四节 核酸的理化性质
        • 2.2.4.1 一、核酸分子具有强烈的紫外吸收
        • 2.2.4.2 二、DNA变性是双链解离为单链的过程
        • 2.2.4.3 三、变性的核酸可以复性或形成杂交双链
        • 2.2.4.4 四、闯关习题
      • 2.2.5 第五节 核酸酶
      • 2.2.6 小结与习题
    • 2.3 第三章 酶与酶促反应
      • 2.3.1 第一节 酶的分子结构与功能
        • 2.3.1.1 一、酶的分子组成中常含有辅助因子
        • 2.3.1.2 二、酶的活性中心是其执行其催化功能的部位
        • 2.3.1.3 三、同工酶催化相同的化学反应
        • 2.3.1.4 四、闯关习题
      • 2.3.2 第二节 酶的工作原理
        • 2.3.2.1 一、酶具有不同于一般催化剂的显著特点
        • 2.3.2.2 二、酶通过促进底物形成过渡态而提高反应速率
        • 2.3.2.3 三、闯关习题
      • 2.3.3 第三节 酶促反应动力学
        • 2.3.3.1 一、底物浓度对反应速率影响的作图呈矩形双曲线
        • 2.3.3.2 二、底物足够时酶浓度对反应速率的影响呈直线关系
        • 2.3.3.3 三、温度对反应速率的影响具有双重性
        • 2.3.3.4 四、pH通过改变酶和底物分子解离状态影响反应速率
        • 2.3.3.5 五、抑制剂可逆地或不可逆地降低酶促反应速率
        • 2.3.3.6 六、激活剂可加快酶促反应速率
        • 2.3.3.7 七、闯关习题
      • 2.3.4 第四节 酶的调节
        • 2.3.4.1 一、酶活性的调节是对酶促反应速率的快速调节
        • 2.3.4.2 二、 酶含量的调节包括对酶合成与分解速率的调节
        • 2.3.4.3 三、闯关习题
      • 2.3.5 第五节 酶的命名与分类
        • 2.3.5.1 一、酶可根据其催化的反应类型予以分类
        • 2.3.5.2 二、每一种酶均有其系统名称和推荐名称
        • 2.3.5.3 第六节 酶与医学的关系
        • 2.3.5.4 一、酶与疾病的发生、诊断及治疗密切相关
        • 2.3.5.5 ​二、酶作为试剂用于临床检验和科学研究
        • 2.3.5.6 三、闯关习题
        • 2.3.5.7 小结及习题
    • 2.4 第四章  聚糖的结构与功能
      • 2.4.1 第一节 糖蛋白分子中聚糖及其合成过程
      • 2.4.2 第二节 蛋白聚糖分子中的糖胺聚糖
      • 2.4.3 第三节糖脂由鞘糖脂、甘油糖脂和类固醇衍生糖脂组成
      • 2.4.4 第四节 聚糖结构中藴藏大量生物信息
      • 2.4.5 小结与习题
  • 3 第二篇 物质代谢篇
    • 3.1 第五章 糖代谢
      • 3.1.1 第一节 糖的摄取与利用
        • 3.1.1.1 一、糖消化后以单体形式吸收
        • 3.1.1.2 二、细胞摄取葡萄糖需要转运蛋白
        • 3.1.1.3 三、体内糖代谢涉及分解、储存和合成三方面
        • 3.1.1.4 四、闯关习题
      • 3.1.2 第二节糖的无氧氧化
        • 3.1.2.1 一、糖的无氧氧化分为糖酵解和乳酸生成两个阶段
        • 3.1.2.2 二、糖酵解的调控是对3个关键酶活性的调节
        • 3.1.2.3 三、糖无氧氧化的主要生理意义是机体不利用氧快速供能
        • 3.1.2.4 四、 其他单糖可转变成糖酵解的中间产物
        • 3.1.2.5 五、闯关习题
      • 3.1.3 第三节糖的有氧氧化
        • 3.1.3.1 一、糖的有氧氧化分为三个阶段
        • 3.1.3.2 二、三羧酸循环使乙酰CoA彻底氧化
        • 3.1.3.3 三、糖有氧氧化是搪分解生成ATP的主要方式
        • 3.1.3.4 四、糖有氧氧化的调节
        • 3.1.3.5 ​五、糖氧化产能方式的选择有组织偏好
        • 3.1.3.6 六、闯关习题
      • 3.1.4 第四节 磷酸戊糖途径
        • 3.1.4.1 一、磷酸戊搪途径分为两个反应阶段
        • 3.1.4.2 二、糖醛酸途径可生成葡萄糖醛酸
        • 3.1.4.3 三、磷酸戊糖途径的生理意义是生成NADPH和磷酸戊糖
        • 3.1.4.4 四、闯关习题
      • 3.1.5 第五节 糖原的合成与分解
        • 3.1.5.1 一、糖原的合成代谢主要在肝和肌组织中进行
        • 3.1.5.2 二、糖原分解从非还原末端进行磷酸解
        • 3.1.5.3 ​三、糖原的合成与分解的关键酶活性调节彼此相反
        • 3.1.5.4 四、糖原积累症是由先天性酶缺陷所致
        • 3.1.5.5 五、闯关习题
      • 3.1.6 第六节 糖异生
        • 3.1.6.1 一、糖异生不完全是糖酵解的逆反应
        • 3.1.6.2 二、糖异生的调节通过对2个底物循环的调节与糖酵解调节彼此协调
        • 3.1.6.3 三、糖异生的生理意义主要在于维持血糖水平恒定
        • 3.1.6.4 ​四、肌收缩产生的乳酸在肝内糖异生形成乳酸循环
        • 3.1.6.5 五、闯关习题
      • 3.1.7 第七节葡萄糖的其他代谢产物
        • 3.1.7.1 一、糖醛酸途径生成葡糖醛酸
        • 3.1.7.2 二、多元醇途径生成木糖醇、山梨醇等
      • 3.1.8 第八节 血糖及其调节
        • 3.1.8.1 一、血糖的来源和去路是相对平衡的
        • 3.1.8.2 二、血糖水平的平衡主要是受到激素调节
        • 3.1.8.3 三、血糖水平异常及糖尿病是最常见的糖代谢紊乱
        • 3.1.8.4 四、高糖刺激产生损伤细胞的生物学效应
        • 3.1.8.5 五、闯关习题
        • 3.1.8.6 小结及习题
      • 3.1.9 话题讨论
    • 3.2 第六章 生物氧化
      • 3.2.1 第一节  线粒体氧化体系与呼吸链
        • 3.2.1.1 一、线粒体氧化体系含多种传递氢和电子的组分
        • 3.2.1.2 ​二、具有传递电子能力的蛋白质复合体组成呼吸链
        • 3.2.1.3 三、NADH和FADH2是呼吸链的电子供体
        • 3.2.1.4 四、闯关习题
      • 3.2.2 第二节   氧化磷酸化与ATP的生成
        • 3.2.2.1 一、氧化磷酸化偶联部位在复合体Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ内
          • 3.2.2.1.1 二、氧化磷酸化偶联机制是产生跨线粒体内膜的质子梯度
            • 3.2.2.1.1.1 三、质子顺浓度梯度回流释放能量用于合成 ATP
              • 3.2.2.1.1.1.1 四、ATP在能量代谢中起核心作用
              • 3.2.2.1.1.1.2 五、闯关习题
      • 3.2.3 第三节  氧化磷酸化的影响因素
        • 3.2.3.1 一、体内能量状态可调节氧化磷酸化速率
        • 3.2.3.2 二、抑制剂可阻断氧化磷酸化过程
        • 3.2.3.3 三、甲状腺激素可促进氧化磷酸化和产热
        • 3.2.3.4 四、线粒体DNA突变可影响机体氧化磷酸化功能。
        • 3.2.3.5 五、线粒体的内膜选择性协调转运氧化磷酸化相关代谢物
        • 3.2.3.6 六、闯关习题
      • 3.2.4 第四节 其他氧化与抗氧化体系
        • 3.2.4.1 一、微粒体氧化系统
        • 3.2.4.2 二、线粒体呼吸链也可产生活性氧
        • 3.2.4.3 三、抗氧化酶体系有清除反应活性氧的功能
        • 3.2.4.4 四、闯关习题
      • 3.2.5 小结及习题
    • 3.3 第七章  脂类代谢
      • 3.3.1 第一节 脂质的构成、功能及分析
        • 3.3.1.1 一、脂质是种类繁多、结构复杂的一类大分子物质
        • 3.3.1.2 二、脂质具有多种复杂的生物学功能
          • 3.3.1.2.1 三、脂质组分的复杂性决定了脂质分析技术的复杂性
      • 3.3.2 第二节   脂类的消化和吸收
        • 3.3.2.1 一、胆汁酸盐协助脂质消化酶消化脂质
        • 3.3.2.2 二、吸收的脂质经再合成进人血循环
        • 3.3.2.3 三、脂质消化吸收在维持机体脂质平衡中具有重要作用
        • 3.3.2.4 四、闯关习题
      • 3.3.3 第三节   甘油三酯代谢
        • 3.3.3.1 一、甘油三酯氧化分解产生大量ATP
        • 3.3.3.2 二、不同来源脂肪酸在不同器官以不完全相同的途径合成甘油三酯
        • 3.3.3.3 三、内源性脂肪酸的合成需先合成软脂酸再加工延长
        • 3.3.3.4 四、闯关习题
      • 3.3.4 第四节    磷脂的代谢
        • 3.3.4.1 一、磷脂酸是甘油磷脂合成的重要中间产物
        • 3.3.4.2 ​ 二、甘油磷脂由磷脂酶催化降解
        • 3.3.4.3 三、鞘磷脂是神经鞘磷脂合成的重要中间产物
        • 3.3.4.4 四、神经鞘磷脂由神经鞘磷脂酶催化降解
        • 3.3.4.5 五、闯关习题
      • 3.3.5 第五节   胆固醇代谢
        • 3.3.5.1 一、胆固醇的合成原料为乙酰CoA和NADPH
        • 3.3.5.2 二、胆固醇的主要去路是转化为胆汁酸
        • 3.3.5.3 三、闯关习题
      • 3.3.6 第六节    血浆脂蛋白代谢
        • 3.3.6.1 一、血脂是血浆所含脂类的统称
        • 3.3.6.2 二、血浆脂蛋白是血脂的运输及代谢形式
        • 3.3.6.3 三、 不同来源血浆脂蛋白具有不同功能和不同代谢途径
        • 3.3.6.4 四、血浆脂蛋白代谢紊乱导致脂蛋白异常血症
        • 3.3.6.5 五、闯关习题
        • 3.3.6.6 小结及习题
    • 3.4 第八章 蛋白质消化吸收和氨基酸代谢
      • 3.4.1 第一节    蛋白质的营养作用
        • 3.4.1.1 一、体内蛋白质的代谢状况可用氮平衡描述
        • 3.4.1.2 二、营养必需氨基酸决定蛋白质的营养价值
        • 3.4.1.3 三、外源性蛋白质消化成寡肽和氨基酸后被吸收
        • 3.4.1.4 四、未消化吸收蛋白质在大肠下段发生腐致作用
        • 3.4.1.5 五、闯关习题
      • 3.4.2 第二节    氨基酸的一般代谢
        • 3.4.2.1 一、体内蛋白质分解生成氨基酸
        • 3.4.2.2 二、外源性氨基酸与内源性氨基酸组成氨基酸代谢库
        • 3.4.2.3 三、氨基酸分解先脱氨基
        • 3.4.2.4 四、氨基酸碳链骨架可进行转换或分解
        • 3.4.2.5 五、闯关习题
      • 3.4.3 第三节    氨的代谢
        • 3.4.3.1 一、血氨有三个重要来源
        • 3.4.3.2 二、氨在血液中以丙氨酸及谷氨酰胺的形式转运
        • 3.4.3.3 三、氨的主要代谢去路是在肝合成尿素
        • 3.4.3.4 四、闯关习题
      • 3.4.4 第四节   个别氨基酸的代谢
        • 3.4.4.1 一、氨基酸的脱羧基作用需要脱羧酶催化
        • 3.4.4.2 二、某些氨基酸在分解代谢中产生一碳单位
        • 3.4.4.3 三、含硫氨基酸的代谢可产生多种生物活性物质
        • 3.4.4.4 四、芳香族氨基酸代谢可产生神经递质
        • 3.4.4.5 五、支链氨基酸的分解有相似的代谢过程
        • 3.4.4.6 五、闯关习题
      • 3.4.5 小结及习题
    • 3.5 第九章 核苷酸代谢
      • 3.5.1 第一节  核苷酸代谢概述
        • 3.5.1.1 一、核苷酸具有多种生物学功能
        • 3.5.1.2 二、核苷酸经核酸酶水解后可被吸收
        • 3.5.1.3 三、核苷酸代谢包括合成和分解代谢
      • 3.5.2 第二节  嘌呤核苷酸的合成与分解代谢述
        • 3.5.2.1 一、嘌呤核苷酸的合成存在从头合成和补救合成两种途径
        • 3.5.2.2 二、嘌呤核苷酸的分解代谢终产物是尿酸
        • 3.5.2.3 四、闯关习题
      • 3.5.3 第三节   嘧啶核苷酸的合成与分解代谢
        • 3.5.3.1 一、嘧啶核苷酸的合成同样有从头合成与补救合成两条途径
        • 3.5.3.2 二、嘧啶核苷酸的分解最终可生成NH3、CO2、β-丙氨酸及β-氨基异丁酸
        • 3.5.3.3 三、闯关习题
      • 3.5.4 小结及习题
    • 3.6 第十章 代谢的整合与调节
      • 3.6.1 第一节  代谢的整体性
        • 3.6.1.1 一、体内各种物质代谢过程互相联系形成一个整体
        • 3.6.1.2 二、物质代谢与能量代谢相互关联
        • 3.6.1.3 三、 糖、脂质和蛋白质代谢通过中间代谢物而相互联系
        • 3.6.1.4 四、闯关习题
        • 3.6.1.5 四、体内各种代谢物都具有共同的代谢池
        • 3.6.1.6 五、ATP是机体储存能量和消耗能量的共同形式
        • 3.6.1.7 六、NADPH提供合成代谢所需的还原当量
      • 3.6.2 ​第二节  代谢调节的主要方式
        • 3.6.2.1 一、细胞内物质代谢主要通过对关键酶活性的调节来实现
        • 3.6.2.2 二、激素通过特异性受体调节靶细胞的代谢
        • 3.6.2.3 三、机体通过神经系统及神经-体液途径协调整体的代谢
        • 3.6.2.4 四、闯关习题
      • 3.6.3 第三节  体内重要组织和器官的代谢特点
      • 3.6.4 第四节  物质代谢的相互联系
        • 3.6.4.1 一、各种能量物质的代谢相互联系相互制约
        • 3.6.4.2 二、糖、脂和蛋白质代谢通过中间代谢物而相互联系
      • 3.6.5 第五节 肝在物质代谢中的作用
        • 3.6.5.1 一、肝是维持血糖水平相对恒定的重要器官
        • 3.6.5.2 二、肝在脂质代谢中占据中心地位
        • 3.6.5.3 三、肝的蛋白质合成及分解代谢均非常活跃
        • 3.6.5.4 四、肝参与多种维生素和辅酶的代谢
        • 3.6.5.5 五、肝参与多种激素的灭活
      • 3.6.6 第六节 肝外重要组织器官的物质代谢特点及联系
        • 3.6.6.1 一、心可利用多种能源物质，以有氧氧化为主
        • 3.6.6.2 二、脑主要利用葡萄糖供能且耗氧量大
        • 3.6.6.3 三、骨骼肌主要氧化脂肪酸，强烈运动产生大量乳酸
        • 3.6.6.4 四、糖酵解是成熟红细胞的供能主要途径
        • 3.6.6.5 五、脂肪组织是储存和释放能量的重要场所
        • 3.6.6.6 六、肾能进行糖异生和酮体生成
      • 3.6.7 第七节  物质代谢调节的主要方式
        • 3.6.7.1 一、细胞水平的代谢调节主要调节关键酶活性
        • 3.6.7.2 二、激素通过作用特异受体调节代谢过程
        • 3.6.7.3 三、机体通过神经系统及神经-体液途径整体调节体内物质代谢
        • 3.6.7.4 小结及习题
    • 3.7 第十九章  肝的生物化学
      • 3.7.1 第一节 肝在物质代谢中的作用
        • 3.7.1.1 一、肝是维持血糖水平相对恒定的重要器官
        • 3.7.1.2 二、肝在脂质代谢中占据中心地位
        • 3.7.1.3 三、肝的蛋白质合成及分解代谢均非常活跃
        • 3.7.1.4 四、肝参与多种维生素和辅酶的代谢
        • 3.7.1.5 五、肝参与多种激素的灭活
      • 3.7.2 第二节  肝的生物转化作用
        • 3.7.2.1 一、肝的生物转化作用是机体重要的保护机制
        • 3.7.2.2 二、肝的生物转化作用包括两相反应
        • 3.7.2.3 三、生物转化作用受许多因素的调节和影响
      • 3.7.3 第三节  胆汁与胆汁酸的代谢
        • 3.7.3.1 一、胆汁可分为肝胆汁和胆囊胆汁
        • 3.7.3.2 二、胆汁酸有游离型、结合型及初级、次级之分
        • 3.7.3.3 三、胆汁酸的主要生理功能
        • 3.7.3.4 四、胆汁酸的代谢及胆汁酸的肠肝循环
      • 3.7.4 第四节   胆色素的代谢与黄疸
        • 3.7.4.1 一、胆红素是铁卟啉类化合物的降解产物
        • 3.7.4.2 二、血液中的胆红素主要与清蛋白结合而运输
        • 3.7.4.3 三、胆红素在肝细胞中转变为结合胆红素并泌入胆小管
        • 3.7.4.4 四、胆红素在肠道内转化为胆素原和胆素
        • 3.7.4.5 五、高胆红素血症及黄疸
      • 3.7.5 小结与习题
  • 4 第三篇 遗传信息传递
    • 4.1 第十一章真核基因与基因组
      • 4.1.1 第一节 真核基因的结构与功能
        • 4.1.1.1 一、真核基因的基本结构
        • 4.1.1.2 二、基因编码区编码多肽链和特定的RNA分子
        • 4.1.1.3 三、调控序列参与真核基因表达调控
      • 4.1.2 第二节  真核基因组的结构与功能
        • 4.1.2.1 一、真核基因组具有独特的结构
        • 4.1.2.2 二、真核基因组中存在大量重复序列
        • 4.1.2.3 三、真核基因组中存在大量的多基因家族与假基因
        • 4.1.2.4 四、线粒体DNA的结构
        • 4.1.2.5 五、人基因组约有两万个蛋白质编码基因
      • 4.1.3 章节测试
    • 4.2 第十二章 DNA的生物合成
      • 4.2.1 第一节DNA复制的基本特征
        • 4.2.1.1 一、DNA——半保留复制的基本规律
        • 4.2.1.2 二、DNA复制从起点向两个方向延伸
        • 4.2.1.3 三、DNA复制以半不连续方式进行
        • 4.2.1.4 四、DNA复制具有高保真性
      • 4.2.2 第二节 DNA复制的酶学和拓扑学变化
        • 4.2.2.1 一、DNA聚合酶催化脱氧核苷酸间的聚合
        • 4.2.2.2 二、DNA聚合酶的碱基选择和校对功能实现复制的保真性
        • 4.2.2.3 三、复制中DNA分子的拓扑学变化
        • 4.2.2.4 四、DNA连接酶连接复制中产生的单链缺口
      • 4.2.3 第三节 原核生物DNA复制过程
        • 4.2.3.1 一、复制的起始
        • 4.2.3.2 二、DNA链的延长
        • 4.2.3.3 三、复制的终止
      • 4.2.4 第四节 真核生物的DNA复制过程
        • 4.2.4.1 一、真核生物复制的起始与原核生物基本相似
        • 4.2.4.2 二、真核生物复制的延长发生DNA聚合醉转换
        • 4.2.4.3 三、真核生物DNA合成后立即组装成核小体
        • 4.2.4.4 四、端粒酶参与解决染色体末端复制问题
        • 4.2.4.5 五、真核生物染色体DNA在每个细胞周期中只能复制一次
        • 4.2.4.6 六、真核生物线粒体DNA按D环方式复制
      • 4.2.5 第五节  逆转录
        • 4.2.5.1 一、逆转录病毒的基因组RNA一逆转录机制复制
        • 4.2.5.2 二、逆转录的发现发展了中心法则
      • 4.2.6 小结与习题
    • 4.3 第十三章 DNA的损伤与修复
      • 4.3.1 第一节 DNA的损伤
        • 4.3.1.1 一、多种因素通过不同机制导致DNA损伤
        • 4.3.1.2 二、DNA损伤有多种类型
      • 4.3.2 第二节 DNA损伤的修复
        • 4.3.2.1 一、有些DNA损伤可以直接修复
        • 4.3.2.2 二、切除修复是最普追的DNA损伤修复方式
        • 4.3.2.3 三、DNA严重损伤时需要重组修复
        • 4.3.2.4 四、某些修复发生在跨越损伤DNA的复制事件之后
      • 4.3.3 第三节DNA损伤和修复的意义
        • 4.3.3.1 一、DNA损伤具有双重效应
        • 4.3.3.2 二、DNA损伤修复障碍与肿瘤等多种疾病相关
      • 4.3.4 小结与习题
    • 4.4 第十四章  RNA的生物合成
      • 4.4.1 第一节原核生物转录的模板和酶
        • 4.4.1.1 一、原核生物转录的模板
        • 4.4.1.2 二、RNA聚合酶催化RNA合成
        • 4.4.1.3 三、RNA聚合酶结合到DNA的启动子上启动转录
      • 4.4.2 第二节 原核生物的转录过程
        • 4.4.2.1 一、转录起始需要RNA聚合酶全酶
        • 4.4.2.2 二、RNA pol核心酶独立延长RNA链
        • 4.4.2.3 三、原核生物转录延长与蛋白质的翻译同时进行
        • 4.4.2.4 四、原核生物转录终止分为依赖p因子与非依赖P因子两大类
      • 4.4.3 第三节 真核生物RNA的生物合成
        • 4.4.3.1 一、真核生物有多种DNA依赖的RNA聚合酶
        • 4.4.3.2 二、顺势作用原件和转录因子再真核生物转录起始中有重要作用
        • 4.4.3.3 三、真核生物转录延长过程中没有转录与翻译同步的现象
        • 4.4.3.4 四、真核生物的转录终止和加尾修饰同时进行
      • 4.4.4 第四节  真核生物前体RNA的加工和降解
        • 4.4.4.1 一、真核前体mRNA经首、尾修饰、剪接和编辑加工后才能成熟
        • 4.4.4.2 二、真核rRNA前体经过剪接形成不同类别的RNA
        • 4.4.4.3 三、真核生物前体tRNA的加工包括核普酸的碱基
        • 4.4.4.4 四、RNA催化一些真核和原核基因内含子的自前
        • 4.4.4.5 五、真核RNA在细胞内的降解有多种途径
      • 4.4.5 小结与习题
    • 4.5 第十五章 蛋白质的生物合成
      • 4.5.1 第一节  蛋白质生物合成体系
        • 4.5.1.1 一、mRNA是蛋白质合成的信息模板
        • 4.5.1.2 二、氨基酰-tRNA通过其反密码子与mRNA中对应的码子互补结合
        • 4.5.1.3 三、核糖体是肽链“装配厂”
        • 4.5.1.4 四、肽链生物合成要酶类和白质因子
      • 4.5.2 第二节  氨基酸与RNA的连接
        • 4.5.2.1 一、氨基酰-tRNA合成酶识别特定氨基酸和tRNA
        • 4.5.2.2 二、肽链合成的起始需要特殊的起始氨基酰-tRNA
      • 4.5.3 第三节  肽链的生物合成过程
        • 4.5.3.1 一、翻译起始复合物的装配启动肽链合成
        • 4.5.3.2 二、在核糖体上重复进行的三步反应延长肽链
        • 4.5.3.3 三、终止密码子和释放因子导致肽链合成停止
      • 4.5.4 第四节  肽链生物合成后的加工和靶向输送
        • 4.5.4.1 一、肽链折叠为功能构象需要分子伴侣
        • 4.5.4.2 二、肽链的肽键水解生成活性蛋白质或功能肽
        • 4.5.4.3 三、氨基酸残基的化学修饰改变蛋白质的活性
        • 4.5.4.4 四、亚基聚合形成功能性白质复合物
        • 4.5.4.5 五、蛋白质合成后被靶向输送至细胞特定部位
      • 4.5.5 第五节  蛋白质生物合成的干扰与抑制
        • 4.5.5.1 一、许多抗生素通过抑制肽链生物合成发作用
        • 4.5.5.2 二、某些毒素制真核生物蛋白质合成
        • 4.5.5.3 三、干扰素经抑制蛋白质生物合成而呈现抗病毒作用
      • 4.5.6 小结与习题
    • 4.6 第十六章  基因表达调控
      • 4.6.1 第一节 基因表达与基因表达调控的基本概念与特点
        • 4.6.1.1 一、基因表达产生有功能的蛋白质和RNA
        • 4.6.1.2 二、基因表达具有时间特异性和空间特异性
        • 4.6.1.3 三、基因表达的方式存在多样性
        • 4.6.1.4 四、基因表达受顺式作用元件和反式作用因子共同调节
        • 4.6.1.5 五、基因表达调控呈现多层次和复杂性
        • 4.6.1.6 六、基因表达调控是生物生长和发育的基础
      • 4.6.2 第二节 原核基因表达调控
        • 4.6.2.1 一、操纵子是原核基因转录调控的基本单位
        • 4.6.2.2 二、乳糖操纵子是典型的诱导型调控
        • 4.6.2.3 三、色氨酸操纵子通过转录衰减的方式阻遏基因表达
        • 4.6.2.4 四、原核基因表达在翻译水平受到精细调控
        • 4.6.2.5 五、原核基因表达在翻译水平的多个环节受到精细调控
      • 4.6.3 第三节 真核基因表达调控
        • 4.6.3.1 一、真核细胞基因表达特点
        • 4.6.3.2 二、染色质结构与真核基因表达密切相关
        • 4.6.3.3 三、转录起始的调节
        • 4.6.3.4 四、转录因子是转录调控的关键分子
        • 4.6.3.5 五、转录起始复合物的动态构成是转录调控的主要方式
        • 4.6.3.6 六、转绿后调控主要影响真核mRNA的结构与功能
        • 4.6.3.7 七、真核基因表达在翻译及翻译后仍可受到调控
      • 4.6.4 小结与习题
    • 4.7 第十七章 细胞信号转导的分子机制
  • 5 第四篇  医学生化专题
    • 5.1 第十八章  血液的生物化学
      • 5.1.1 第一节  血浆蛋白质
        • 5.1.1.1 一、血浆蛋白质的分类与性质
        • 5.1.1.2 二、血浆蛋白质的功能
      • 5.1.2 第二节  血红素的合成
        • 5.1.2.1 一、血红素的合成过程
        • 5.1.2.2 二、血红素合成的调节
      • 5.1.3 第三节  血细胞物质代谢
        • 5.1.3.1 一、红细胞的代谢
        • 5.1.3.2 二、白细胞的代谢
      • 5.1.4 小结与习题
    • 5.2 第二十章  维生素
      • 5.2.1 第一节  脂溶性维生素
        • 5.2.1.1 ​一、维生素A
        • 5.2.1.2 二、维生素D
        • 5.2.1.3 三、维生素E
        • 5.2.1.4 四、维生素K
      • 5.2.2 第二节  水溶性维生素
        • 5.2.2.1 一、维生素B1
        • 5.2.2.2 二、维生素B2
        • 5.2.2.3 三、维生素PP
        • 5.2.2.4 四、泛酸
        • 5.2.2.5 五、生物素
        • 5.2.2.6 ​六、维生素B6
        • 5.2.2.7 七、叶酸
        • 5.2.2.8 八、维生素B12
        • 5.2.2.9 九、维生素C
      • 5.2.3 小结与习题
  • 6 实验
    • 6.1 实验一 实验基本操作
    • 6.2 实验二 蛋白质含量的测定
    • 6.3 实验三 DNA的琼脂糖凝胶电泳
    • 6.4 实验四 血糖浓度的测定
    • 6.5 实验五 肝糖原的提取和鉴定
    • 6.6 实验六 血清总胆固醇的测定（胆固醇氧化酶法）
    • 6.7 实验七 血清丙转氨酶活力的测定(改良赖氏法)
    • 6.8 实验八 人外周血白细胞DNA的提取
    • 6.9 实验九 目的基因的PCR扩增
    • 6.10 实验十 目的基因片段与载体的连接
    • 6.11 实验十一 质粒DNA的小量快速提取（碱裂解法）
    • 6.12 实验十二 目的基因与载体的限制性双酶切
    • 6.13 实验十三大肠杆菌感受态细胞的制备、转化与筛选
实验八 人外周血白细胞DNA的提取
  • 1 讲义
  • 2 课件

实验八 人外周血白细胞DNA的提取

Operation and Calibration of Pipette and Micropipette & Data Processing

实验目的

1、掌握人血DNA提取的原理和方法。

2、了解DNA提取的其他各种方法。

问题

1. 真核生物细胞结构复杂，各细胞器成分不同，DNA主要存在于哪些细胞器？如何能将DNA与其 它成分(蛋白质、RNA、多糖、脂类、无机盐等) 分开？

2. 真核生物DNA提取方法有哪些？各有什么优缺点？

实验原理

    从全血中制备白细胞DNA，可用水的低渗作 用直接破裂血中红细胞、白细胞及其它细胞的细胞膜及核膜，释出血红蛋白、细胞核并 溶解DNA；再用氯仿/异戊醇使蛋白质变性除去，最后加无水乙醇使DNA沉淀，用 A260/A280检测DNA含量，再经琼酯糖电泳 定性鉴定。

实验器材与试剂

（一）器材 离心机、紫外分光光度计、1.5ml离心管。

（二）试剂

1. 5mol/L KI溶液 称取8.3g KI加ddH2O定 容至10 mL。

2. 0.9% NaCl溶液。

3. 氯仿/异戊醇（24:1）。

实验操作

1. 取200 μL抗凝血，加入1mL双蒸水。

2. 8 000 r/min离心5min，弃上清。

3. 在沉淀中加入5 mol/L KI溶液40 μL， 漩涡振荡30 s。

4. 加入0.9%NaCl溶液200 μL，再加入300 μL氯仿/异戊醇，振荡30 s，1 0000 r/min离心5 min。

5. 小心吸取上清液，加入冰的无水乙醇1mL。

6. 10 000 r/min离心5 min，小心弃无水乙醇。

7. 待DNA样品自然干燥。

8. 加适量（约50 μL）ddH2O或TE溶解DNA (注意: ddH2O和TE各有什么优缺点)。

9. 核酸定量测定和电泳鉴定。

                                                    图：DNA样品电泳图


思考题

• DNA有哪些理化性质？在抽提DNA时需考虑哪些因素的影响？

• 在抽提DNA时需要对哪些器械消毒？如何避免对抽提DNA的污染？

• 抽提的DNA如何长期保存？