实验四 细胞生理活动观察

[目的要求]

1、了解诱导小鼠腹腔巨噬细胞吞噬活动的实验原理和观察方法。

2、熟悉细胞吞噬作用的基本过程。

[实验原理]

单细胞动物的吞噬作用，是摄取营养物质的主要方式。而高等动物的吞噬细胞（如巨

噬细胞、嗜中性粒细胞等）专司吞噬作用，是机体免疫功能的重要组成部分。单核细胞起

源于骨髓，经血液进入组织中逐渐转化成巨噬细胞，分布于全身各处。当机体受到某些损

害因素的干扰时（如异物入侵），巨噬细胞能主动向入侵的异物游走，当接触异物时，质

膜凹陷伸出伪足将其包围，并发生内吞作用形成吞噬泡将异物吞入胞内，胞质内的初级溶

酶体与吞噬泡融合，从而消化分解异物，以发挥防御功能。本实验利用小鼠腹腔注射淀粉

肉汤以刺激腹腔产生较多的巨噬细胞，然后再往腹腔注射 1%鸡红细胞悬液，诱导巨噬细胞

吞噬鸡红细胞来观察细胞的吞噬活动过程。

[实验用品]

1、器材：显微镜、镊子、解剖剪、眼科剪、载玻片、盖玻片、吸水纸、注射器。

2、试剂：6%淀粉肉汤（含台盼蓝）。

3、材料：1%鸡红细胞悬液、小白鼠。

[实验内容]

1、在实验前两天，每天给每只小白鼠腹腔注射 6%淀粉肉汤 1ml（含台盼蓝，起标记

作用），淀粉肉汤以异物形式进入机体，刺激腹腔产生较多的巨噬细胞。

2、实验时，每组取一只注射过淀粉肉汤的小白鼠，使用苦味酸涂抹小鼠毛发作为标记，

然后往腹腔注射 1%鸡红细胞悬液 1 ml～2 ml，注射后轻揉小白鼠腹部，使悬液分布均匀。

3、30 分钟后，用颈椎脱臼法（一手夹住鼠颈，另一手捏住鼠尾牵拉，直至死亡为止）

处死小白鼠。

4、剖开腹腔，用未装针头的注射器贴着腹腔的背壁处抽取腹腔液，滴 1 滴腹腔液于载

玻片上、盖上盖玻片制成一张临时装片，静置片刻后镜检。

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5、在高倍镜下观察，可见许多体积较大的圆形或形态不规则的巨噬细胞（因未染色，

不易见到细胞核），其胞质中含有数量不等的蓝色颗粒（即吞入含台盼蓝的淀粉肉汤所形

成的吞噬泡）；还可见少量淡黄色椭圆形有核的鸡红细胞。慢慢移动玻片标本，仔细观察

视野中的巨噬细胞，可看到有的鸡红细胞（一个或多个）紧贴于巨噬细胞表面，有的已部

分被吞入，有的巨噬细胞已吞入了一个或多个鸡红细胞形成了吞噬泡。想一想，巨噬细胞

如何进一步消化分解被吞入的鸡红细胞？

[作业]

1、细胞吞噬活动对单细胞动物来说其重要意义是什么？

2、人体内也有吞噬细胞的活动，请说明这种吞噬细胞存在的意义。

3、本实验为什么要事先往小鼠腹腔中注射含有台盼蓝的淀粉肉汤？被台盼蓝标记的细

胞对完成本实验的观察有什么作用？

4、完成本实验时，在低倍镜下看到物像后，转到高倍镜时视野很暗，你是通过哪种方

法来改变视野亮度的？通常还可以采用哪些方法？

附：试剂的配制方法

1、6%淀粉肉汤：牛肉膏 0.3g、蛋白胨 1g、NaCl 0.5g、可溶性淀粉 6g，用蒸馏水

100ml 溶解后，加入适量 1%台盼蓝溶液，煮沸灭菌，置 4℃冰箱保存，使用前用 37℃水浴

锅溶化。