实验二 细胞的基本形态与结构

[目的要求]

1、掌握光镜下真核细胞的基本形态结构。

2、初步掌握临时制片和实验小动物的处里方法。

3、进一步掌握显微镜的使用方法。

[实验原理]

细胞是生命活动的基本结构单位和功能单位。人体内有大约200多种不同类型的细胞，它们的形态多种多样，有球形、椭圆形、扁平形、立方形、长梭形、星形等。细胞的形态都与它们的功能相适应。虽然细胞在形态上多种多样、大小不一，但都具有共同的基本结构，都是由细胞膜、细胞质和细胞核组成。人类细胞的大小约为 10～20μm，是肉眼观察范围之外，必须借助于显微镜才可以观察到。普通光学显微镜最大分辨率大约为0.2μm左右，在光镜下，通过特殊的染色，还可以看到一些比较大的细胞器如线粒体、高尔基体、中心体、核膜、核仁和染色质等。本实验主要是通过实验观察细胞的基本形态和细胞膜、细胞质和细胞核等细胞结构。

[实验用品]

1、器材：光学显微镜、解剖器材、载玻片、盖玻片、吸管、培养皿、牙签、吸水纸、擦镜纸。

2、试剂：革兰氏碘液、生理盐水、无水乙醇、香柏油。

3、材料：人口腔上皮细胞、平滑肌分离片、骨骼肌纵切片、脊髓神经涂片、小肠绒毛上皮细胞切片、牛蛙、雄性成熟小鼠。

[实验内容]

（一）口腔粘膜上皮细胞制片与观察

1、制作临时制片：在载玻片中央滴一滴生理盐水，取一根牙签，将其粗端在自己口腔的面颊部刮几下，将刮下的细胞洗于玻片上的生理盐水中，吸一滴碘液滴在玻片上的生理盐水上，染色 1～2 分钟，然后用小镊子夹取一盖玻片，使其左侧边缘与载玻片上的液体相接触，慢慢盖下，以免产生气泡。使用吸水纸把多余的液体吸干。

2、观察：将制好的临时玻片标本置于显微镜的载物台上，先用低倍镜（10 倍）观察，可见被染成黄色的细胞，成群或分散存在。观察时，将显微镜镜头的光圈缩小或下降聚光器，选择完整而细胞结构清楚的细胞移至视野中央，再转换高倍镜观察以下结构（图 3-1）。

(1)细胞膜：也称质膜，是包围于细胞最外的一层薄膜（如铺展不好，则细胞膜会出现皱褶）。

(2)细胞核：位于细胞中部，染色较深，呈圆形或椭圆形，核中可见一致密的结构，即为核仁。

(3)细胞质：是细胞膜与细胞核之间的区域。

（二）蟾蜍血涂片的制备与观察

破坏脊髓法：

以破坏脊髓法处死蟾蜍，剖开胸腔，打开心包，小心地将心脏剪一小口并迅速取心脏血制成血涂片（取一滴蟾蜍血滴在载玻片的一端，将另一载玻片的一端紧贴在血滴的前缘，呈 30 ~45 角均匀用力向前推，使血液在载片上形成均匀的薄层），室温晾干（图 3-2）。先在低倍镜下（将光线调暗）观察血涂片，可见大量的血细胞，选择一细胞密度较小的地方移至视野中央，转换高倍镜观察，可见红细胞呈椭圆形，有细胞核（图 3-3）。

（三）精子悬液的制备和观察

颈椎脱臼法：

取一成年雄性小鼠，用颈椎脱臼法处死，打开腹腔取出睾丸，放入盛有 1～2m1 生理盐水的培养皿中；用剪刀剪开睾丸精细管，用牙签在培养皿的生理盐水中充分搅拌使精子游离出来，制成精子悬液。吸一滴精子悬液于洁净的载玻片上，加上盖玻片，低倍镜下用暗视野观察。镜下可见到许多活动的精子，它们形如蝌蚪，由头部、中段和尾丝三部分构成，能运动（图 3-4）。

（四）大白鼠小肠上皮切片观察

取一小肠横切片，对着光用肉眼观察可见到小肠肠腔（图 3-5）。低倍镜下可见小肠肠腔四周有许多指状的突

起，即绒毛。选择一根典型的绒毛移至视野中央转换高倍镜观察，小肠上皮为单层柱状上皮，由大量的柱状细胞及一些杯状细胞交错紧密排列而成。

1、柱状细胞：呈高柱状，核呈椭圆形染色较深。细胞向着肠腔的游离端有纹状缘（与吸收有关）。

2、杯状细胞，分布在柱状上皮细胞之间，形如高脚杯状。杯口向着细胞游离面，细胞核位于基底部附近。细

胞质中有一个大卵圆形的空腔，其中充满粘液，从杯口中分泌至细胞表面，对小肠上皮有保护作用。

（五）骨骼肌纵切片观察

低倍镜下可见骨骼肌由许多肌纤维构成。每根肌纤维呈圆柱状，有许多细胞核，紧贴于细胞膜内缘，每条肌纤维包含许多肌原纤维，在其上有明暗相间的横纹，故骨骼肌又称横纹肌（图 3-6）。

（六）平滑肌分离片的观察

低倍镜下可见平滑肌细胞呈长梭形，彼此交错排列，细胞核呈棒状或椭圆形，常位于肌细胞的中央（图 3-7）。

（七）脊髓灰质前角神经细胞涂片的观察

在低倍镜下可见许多被染成红色的、较完整的多突神经细胞即脊髓前角细胞，其胞体为不规则的三角形或菱形，周围有长短不等的突起（称树突与轴突，不易分辨）。细胞核圆形，染色较深（图 3-8）。

五、作业及思考题

1、绘人口腔上皮细胞、平滑肌细胞和神经细胞图，并注明各部分结构名称。

2、血涂片的推片过程中为什么要求只能推一次而不能来回涂布？

3、人口腔上皮细胞的立体图应该是扁平形还是立方形的？为什么？

4、说明平滑肌为什么是长梭形，红细胞是椭圆形的？它与哪些功能相适应？

5、神经细胞的胞体有很多树突和一条长的轴突相连，请说明神经细胞存在这些结构

的意义。

6、在本实验中,你对下面几个显微镜使用中出现的问题都解决了吗?

(1)转高倍镜后物像不在视野中央；

(2)记录物像坐标的方法；

(3)使用油镜的方法。

附 附 1 1 ：革兰氏碘液的配制

称取 2g 碘化钾溶于 100ml 蒸馏水中，再加入 1g 碘使其溶解，最后用蒸馏水稀释至300ml，盛于棕色瓶内保存与阴暗处。

附 附 2 2 ：生物学绘图方法与要求

在进行生物学实验时，应把观察的结果用绘图或简炼的文字记录下来，以加深印象，便于复习。现将生物学绘图的基本方法与要求介绍如下：

（1）绘图基本工具：铅笔（HB、3H）、红蓝铅笔、小刀、尺、橡皮、绘图纸等。

（2）生物绘图必须真实，绘图前应选择优良的、有代表性的标本，按照实物的形态、

各部分比例，位置及毗邻关系进行描绘。

（3）绘图需按一定比例、布局整洁美观、大小适中。图的下方注明该名称。

（4）图的注释应从各部分结构作出水平引线，结构名称写于引线未端，书写要整齐。

（5）绘图时先用软沿笔轻轻绘出轮廓，修改再用硬沿笔以粗细均匀的线条绘出全图。

图的明暗和立体感可用细圆点的疏密来表示，不要涂阴影，必要时可用彩色呈现标本的颜色。