【病例】患者，男，65岁，因“反应迟钝伴口齿不清十余天”于2010年11月18日入院。查体：体温：36.8℃，脉搏：96次/分，呼吸：20次/分，血压：156/84mmHg。既往史：有糖尿病史十余年，不规律服用格列齐特控制血糖，效果不佳。有时会出现双下肢水肿，利尿后好转。入院诊断：脑梗塞；II型糖尿病。肺部CT＋增强（11月24日）、腹部CT＋增强（11月25日）扫描检查，CT增强检查的造影剂是碘普罗胺（优维显，100ml：30g碘）。患者于次日出现双下肢浮肿，尿量减少，24小时尿量400ml，48h后出现无尿，静推呋塞米无效。当日急查肌酐 475μmol/L，尿素氮24.26mmol/L，请肾内科会诊后考虑急性肾功能衰竭，予急诊血液透析治疗。连续血液透析5天后，患者肾功能逐渐恢复，尿量逐渐增加，予停止血液透析治疗。

【分析与思考】

1．肾脏的正常功能是什么？

2．尿生成受那些因素的调节？

3．急性肾衰竭的临床表现是什么？

4．急性肾衰竭的动物模型有哪些？

5．如何测定水从摄入到生成尿液排出需要的时间？有哪些指示剂可以使用？

【实验对象】

家兔

【实验用品】

生物信号采集处理系统，全自动生化分析仪，哺乳类动物手术器械, 兔手术台 , 注射器, 膀胱插管,培养皿, 纱布,20%氨基甲酸乙酯溶液(乌拉坦)，50%甘油，生理盐水, 20%葡萄糖, 1% 呋塞咪, 垂体后叶素, 0.6%酚红注射液, 尿素氮、血肌酐测定试剂盒。

【实验设计】

根据主要问题和给定的实验对象和实验用品，设计实验观察急性肾衰竭时肾脏功能的变化。

【实验步骤】

1．动物准备

   （1）耳缘静脉注射20％氨基甲酸乙酯溶液（5ml/kg）麻醉家兔,卧位固定于兔手术台。                   （2）颈部手术，分离颈外静脉，做颈外静脉插管。

   （3）腹部手术：在耻骨联合上方，沿正中线做约3cm的切口，沿腹白线剪开腹壁，将膀胱移出体外。辨认清楚膀胱结构后，选择血管较少部位做一小切口，插入膀胱插管，用粗线结扎固定。注意保持插管与输尿管之间的畅通，避免堵塞。将插管与量筒连接，记录尿量。

（4）在颈部、腹部手术完毕后，均用浸有38℃的生理盐水纱布覆盖创面。

2．连接实验装置

3．记录一段时间（20min，以下同）的尿量，测定尿素氮，采血测定血肌酐（Scr）。

4．肌肉注射50%甘油 10ml/kg体重，两小时后观察观察如下项目：

（1）记录一段时间（20min）的尿量。测定尿素氮。

（2）静脉采血测定血肌酐。

（3）快速静脉注射生理盐水40ml，观察尿量的变化。

（4）静脉注射垂体后叶素（ADH）2IU，观察尿量的变化。

（5）静脉注射0.1%速尿0.5ml/kg，观察尿量的变化。

（6）静脉注射50％葡萄糖溶液5ml，观察尿量的变化。

（7）静脉注射0.6%酚红溶液0.5ml，用盛有10%NaOH溶液的培养皿盛接尿液。如果尿中有酚红排出，遇NaOH则呈现红色。计算从注射酚红起到排出酚红所需要的时间。

【实验结果】

1．将各项实验所见的尿量变化，逐一记录。

2．比较注射甘油前后尿素氮、血肌酐含量的变化。

3．统计各组的实验结果，比较各种处理前后尿量变化，分析其原因。

【注意事项】

1．手术操作应轻柔，避免过多的损伤刺激，避免造成操作性尿闭。

2．在前一项实验产生的效应基本消失后，再做下一步实验。