【病例】

患者，女，54岁。之前因不易入睡，每天睡前口服0.1g司可巴比妥帮助入睡。现因家庭矛盾吞服司可巴比妥约50g，2h后，被家人送往医院抢救。查体：血压115/70mmHg，呼吸浅慢，不规律，意识不清，双侧瞳孔缩小，对光反应迟钝，压眶无反应，口唇发紫，心音低钝，律齐，心率100次/min，两肺湿啰音，体检过程中病人突然呼吸骤停，行气管插管，配合呼吸机人工呼吸，同时正压给氧，大量温盐水反复洗胃，至洗胃液澄清为止，美解眠150mg,回苏灵16mg交替静脉滴注，5%碳酸氢钠注射液250ml静脉滴注，间断给予20%甘露醇注射液及呋塞米注射液20mg静注，并予以地塞米松注射液30mg，能量合剂及脑复康、维生素C等，应用广谱抗生素预防感染。抢救6h后，病人自主呼吸恢复，住院期间补钾监测尿量，10天后痊愈出院。

【分析与思考】

1．患者服用司可巴比妥约50g后发生了哪些不良反应？

2．造成这种不良反应的原因是什么？属于那种不良反应？

3．药物的不良反应主要包括哪些类型？

4．镇静催眠药司可巴比妥正常给药剂量是每天睡前0.1g，是比较安全的，那么如何评价药物的安全性？指标有哪些？

5．测定LD50的意义是什么？

6．为何选择测定LD50作为衡量药物毒性大小的指标？

7．如何测定药物的LD50？有哪些方法？优缺点是什么？

8．如何设计实验测定药物的LD50？注意事项有哪些？

【实验动物】

小白鼠，体重18～24g，雌雄各半，实验前禁食12小时，不禁水

【实验器材和药品】

小鼠笼，大镊子，天平，量筒，注射器（1ml），0.01%硝酸士的宁（strychninenitrate）。

【实验设计】

根据病例分析和给定的实验条件，设计一个动物实验，利用序贯法测定硝酸士的宁的LD50。

【参考实验方案】

【实验步骤和观察项目】

1．预实验

（1）探索剂量范围：先找出100%与0%的致死量（或阳性反应的剂量）为实验的上下限剂量（Dmax和Dmin）。取动物若干，每4只一组，按估计量给药，如出现4/4死亡时，下一组剂量降低，当出现3/4死亡时，则上一剂量为Dmax；如降低一剂量出现的死亡率2/4或1/4时，应考虑到4/4死亡剂量组在正式实验时可能出现死亡率低于70%，为慎重起见可将4/4死亡剂量乘以1.4倍，作为Dmax。同法找出Dmin。

（2）选择合适的剂量分组方案：组数（G）以5～8组为宜，组间剂量公比为r。在确定组数后，按下列公式求算r。

r =（Dmax/Dmin）1/（G-1）

     再按公比计算各组剂量D1，D2，D3……Dm，其中D1=Dmin，为最小剂量，D2=D1×r，D3=D2×r, ……Dm=Dm-1×r。

2．正式实验：

（1）拟定鼠所需剂量：根据预实验结果，本实验采用组间对数剂量的等差值为0.05。

表1  序贯法LD50测试结果记录表

（2）每组取小鼠10～12只，取一只鼠称重，选取表中任一剂量按体重给药，采用腹腔注射。

（3）观察、记录给药后10 min之内动物死亡情况：若小鼠在10 min死亡，记为（+），若不死亡，记为（－）。必须根据前一只动物的实验结果确定下一只动物所需剂量，一只一只的做，故称为序贯法。若死亡，则下一只小鼠采用相邻的下一个剂量；若存活，则采用相邻的上一个剂量，故本法也称为上下法。因此剂量的大小应由上组决定（记录在表1中）。

（4）在上述依次接受实验的各鼠中，以结果出现质的变化的鼠开始作为第1号鼠，依次为2号、3号…直做到第9号动物，第10只小鼠不需要再做实验，根据第9号结果即可确定第10号鼠所在的剂量组位置。

（5）统计以上的结果，代入下列公式，计算LD50。

LD50=log-1（ΣC/ΣT）

    上表中为某次实验的结果，依此为例，计算如下： LD50=log-1[（0.2+0.6+0.4+0.05）/（1+4+4+1）]= log-10.125=1.33 mg/kg

【注意事项】

1．本实验为定量药物效应测定，精确性要求高，在实验的过程中，各个环节均须精确无误。

2．小鼠捉拿宜熟练掌握，避免抓伤咬伤。

3．给药：一次性给药，pH及渗透压均在生理范围内，给药与注射速度保持一致。腹腔注射选择小鼠左下腹，减少首关效应。

 #科学与人文# 

There is no safe drug but safe doctor.（没有安全的药物，只有安全的医生）

屠呦呦与青蒿素

屠呦呦，女，汉族，中共党员，药学家。1930年12月30日生于浙江宁波，1951年考入北京大学，在医学院药学系生药专业学习。1955年，毕业于北京医学院（今北京大学医学部）。毕业后曾接受中医培训两年半，并一直在中国中医研究院（2005年更名为中国中医科学院）工作，期间前后晋升为硕士生导师、博士生导师，现为中国中医科学院的首席科学家。中国中医研究院终身研究员兼首席研究员，青蒿素研究开发中心主任，博士生导师、药学家，诺贝尔医学奖获得者。

屠呦呦多年从事中药和中西药结合研究，突出贡献是创制新型抗疟药青蒿素和双氢青蒿素。1972年成功提取到了一种分子式为C15H22O5的无色结晶体，命名为青蒿素。2011年9月，因为发现青蒿素——一种用于治疗疟疾的药物，挽救了全球特别是发展中国家的数百万人的生命获得拉斯克奖和葛兰素史克中国研发中心“生命科学杰出成就奖”。2015年10月，屠呦呦获得诺贝尔生理学或医学奖，理由是她发现了青蒿素，这种药品可以有效降低疟疾患者的死亡率。她成为首获科学类诺贝尔奖的中国人。

屠呦呦是第一位获得诺贝尔科学奖项的中国本土科学家、第一位获得诺贝尔生理医学奖的华人科学家， 是中国医学界迄今为止获得的最高奖项，也是中医药成果获得的最高奖项。

2017年1月9日，屠呦呦获得2016年度国家最高科学技术奖。 2018年12月18日，党中央、国务院授予屠呦呦同志改革先锋称号，颁授改革先锋奖章。

1969年，中国中医研究院接受抗疟药研究任务，屠呦呦任科技组组长。

1969年1月开始，屠呦呦领导课题组从系统收集整理历代医籍、本草、民间方药入手，在收集2000余方药基础上，编写了640种药物为主的《抗疟单验方集》，对其中的200多种中药开展实验研究，历经380多次失败，利用现代医学和方法进行分析研究、不断改进提取方法，终于在1971年获得青蒿抗疟发掘成功。

1972年，屠呦呦和她的同事在青蒿中提取到了一种分子式为C15H22O5的无色结晶体，一种熔点为156℃～157℃的活性成份，他们将这种无色的结晶体物质命名为青蒿素。青蒿素为一具有“高效、速效、低毒”优点的新结构类型抗疟药，对各型疟疾特别是抗性疟有特效。1986年“青蒿素”获得了一类新药证书（86卫药证字X-01号）。1979年获“国家发明奖”。

1973年为确证青蒿素结构中的羰基，合成了双氢青蒿素。又经构效关系研究，明确在青蒿素结构中过氧是主要抗疟活性基团，在保留过氧的前提下，羰基还原为羟基可以增效，为国内外开展青蒿素衍生物研究打开局面。

1972年3月，屠呦呦在南京召开的“523”项目工作会议上报告了实验结果。

1973年，屠呦呦合成出了双氢青蒿素，以证实其羟（基）氢氧基族的化学结构，但当时她却不知道自己合成出来的这种化学物质以后被证明比天然青蒿素的效果还要强得多。

1977年3月，以“青蒿素结构研究协作组”名义撰写的论文《一种新型的倍半萜内酯——青蒿素》发表于《科学通报》（1977年第3期）。

1978年，“523”项目的科研成果鉴定会最终认定青蒿素的研制成功，按中药用药习惯，将中药青蒿抗疟成分定名为青蒿素。

1981年10月，在北京召开了由世界卫生组织等主办的国际青蒿素会议上，屠呦呦以首席发言人的身份作《青蒿素的化学研究》的报告，获得高度评价，认为“青蒿素的发现不仅增加一个抗疟新药，更重要的意义还在于发现这一新化合物的独特化学结构，它将为合成设计新药指出方向”。 

1992年“双氢青蒿素及其片剂”获一类新药证书（92卫药证字X-66、67号）和“全国十大科技成就奖”。

1992 年，针对青蒿素成本高、对疟疾难以根治等缺点，发明出双氢青蒿素（抗疟疗效为前者10倍的“升级版”）。

2009年，屠呦呦编写的《青蒿及青蒿素类药物》出版。