【病例】
患者,男性,53岁。因车祸入院,入院时神志清楚,麻醉过程中应用筒箭毒碱作为辅助用药,静脉给药3min后,头及眼睑下垂,失语,吞咽困难,四肢肌肉麻痹,呈腹式呼吸,静脉淤血、青紫,脉细弱,少尿,唾液分泌过多。临床诊断为筒箭毒碱中毒(tubocurarine poisoning)。
【分析与思考】
1.骨骼肌神经-肌接头处兴奋的传导是怎么发生的?
2.骨骼肌松弛药有哪些?作用机制如何?
3. 筒箭毒碱过量产生的肌松作用应用什么药物解救?机制如何?
4. 局麻药物丁卡因对神经的兴奋传导有何影响?为什么?
5. 哪种动物标本最适合观察筒箭毒碱的肌松作用?
6. 如何制备大鼠坐骨神经-胫前肌标本?
7. 制备坐骨神经胫前肌标本时应注意哪些问题?
8. 如何检查所制备的标本的兴奋性?
9. 骨骼肌的收缩形式有哪些?在体骨骼肌的收缩属于什么形式?
10. 给予新斯的明和筒箭毒碱后可能出现的结果有哪些?试分析其原因。
11. 在给药过程中有哪些问题需要注意?
【实验对象】
大鼠
【实验用品】
BL-420N生物信号采集与分析系统,哺乳类动物手术器械1套,小动物手术台,气管插管,小动物人工呼吸机,引导保护电极2个,针式电极1个,刺激保护电极1个,张力换能器,注射器(1ml、2ml),静脉插管,信号输入引导线,刺激输出线,万能支柱等;20%氨基甲酸乙酯(乌拉坦),0.01%氯化筒箭毒碱,0.05%新斯的明,1%丁卡因,生理盐水等。
【实验设计】
根据主要问题和给定的实验对象和实验用品,设计一个动物实验来分析新斯的明,筒箭毒碱等药物之间的相互作用及其对神经肌肉兴奋传递的影响。
【参考实验方案】
骨骼肌受到运动神经的支配。当神经冲动沿神经干传导至神经-肌肉接头时,首先引起接头前膜去极化,量子式释放乙酰胆碱(acetylcholine,ACh),ACh迅速与接头后膜上的N2受体结合,导致终板电位产生和肌膜兴奋,通过兴奋-收缩耦联,引起肌肉收缩。而ACh迅速地被接头间隙的胆碱酯酶水解灭活。氯化筒箭毒碱(Tubocurarine Chloride)可竞争性地阻断N2受体,引起骨骼肌松弛。新斯的明(Neostigmine)可抑制胆碱酯酶,使神经末梢释放的ACh不被破坏,ACh浓度升高可竞争性对抗筒箭毒碱的肌松作用。本实验拟通过观察神经动作电位、肌电与肌肉收缩的变化,了解氯化筒箭毒的肌松作用,掌握其作用机制,了解新斯的明对抗筒箭毒碱的作用,观察局麻药对坐骨神经传导的麻醉作用。
【实验对象】
大鼠
【实验用品】
BL-420N生物信号采集处理系统,哺乳类动物手术器械1套,小动物手术台,气管插管,小动物人工呼吸机,引导保护电极2个,针式电极1个,刺激保护电极1个,张力换能器,注射器(1ml、2ml),静脉插管,信号输入引导线,刺激输出线,万能支柱等;20%氨基甲酸乙酯(乌拉坦),0.01%氯化筒箭毒碱,0.05%新斯的明,1%丁卡因,生理盐水等。
【实验步骤与观察项目】
1.麻醉、手术、连接装置
取大白鼠1只,腹腔注射20%氨基甲酸乙酯0.5ml/100g进行麻醉,然后仰卧位固定于鼠手术台上。分离气管及颈外静脉,分别插入气管插管和静脉插管。准备好人工呼吸机。
剪开大鼠一侧下肢皮肤,分离坐骨神经和胫前肌。在坐骨神经下放置刺激保护电极和引导电极,并与BL-420N生物信号采集处理系统相连;将针式电极插入胫前肌,并与实验系统连接;在胫前肌缝一条线,通过张力换能器与实验系统连接,以记录肌肉的收缩曲线。
启动BL-420N生物信号采集处理系统,进行实验通道参数设置,如1通道显示坐骨神经动作电位,2通道显示肌电信号,3通道显示肌肉收缩曲线;设置实验参数和调整扫描速度,调节刺激器的参数设置,以串刺激刺激神经。
2.观察项目
①电刺激坐骨神经,观察并记录坐骨神经动作电位、肌电及肌肉收缩的情况;
②缓慢静脉注射0.01%氯化筒箭毒碱0.1ml/100g,观察动作电位及肌电的变化情况;密切注意大白鼠的呼吸,当其呼吸停止时,立即进行人工呼吸;
③当显示肌电消失时,注意坐骨神经动作电位活动是否存在。然后,用电极直接刺激肌肉,观察并记录肌电活动与肌肉的收缩;
④停止刺激肌肉,持续刺激坐骨神经,同时缓慢静脉注射0.05%新斯的明0.15ml/100g,观察并记录坐骨神经动作电位、肌电及肌肉收缩的情况;
⑤将润湿1%丁卡因的棉球敷在刺激电极和引导电极之间的坐骨神经上。10min后,电刺激坐骨神经,观察并记录坐骨神经动作电位、肌电及肌肉收缩的情况;然后,直接刺激肌肉,观察肌电及肌肉收缩的情况。
【注意事项】
1.分离坐骨神经时注意手和金属器械不能碰到神经,应使用玻璃分针,避免神经损伤,同时避免过度牵拉或其他不良刺激伤及神经肌肉。
2.电刺激坐骨神经的刺激强度要适当,不宜过强。如效果不好,可使用液体石蜡覆盖刺激电极和引导电极。
3.在标本制备过程中,应经常滴加任氏液以防神经干燥。
4.在静脉注射筒箭毒碱和新斯的明是注射速度不宜过快,以免引起动物呼吸麻醉而导致其死亡,影响实验结果;当其呼吸停止时立即进行人工呼吸。

