蛙类动物的一些基本生命活动和生理功能与哺乳动物有相似之处，且维持其离体组织正常活动所需要的理化条件比较简单，易于模拟和控制。因此，在机能学实验中常用蟾蜍或蛙的标本来观察和研究兴奋性、兴奋过程、刺激与肌肉收缩的一些规律和特点等。制备坐骨神经-腓肠肌标本是机能学实验的一项基本操作技术。

1．破坏脑和脊髓  取一只蟾蜍，用自来水冲洗干净。用左手的中指和无名指夹住蟾蜍的前肢，躯干和后肢握在手里，拇指前推、食指压住头部前端使头前俯。右手持探针自枕骨大孔垂直刺入，左右划动横断脑和脊髓。接着将探针向前刺入颅腔，左右搅动充分捣毁脑组织。然后将探针沿原路撤回至进针点（不要拔出），转向后刺入椎管，反复上下提插、捻动充分捣毁脊髓。此时如蟾蜍的呼吸停止、四肢松软，表明脑和脊髓已完全破坏，否则重复上述操作再行捣毁。

2．剪除躯干上部和内脏  蟾蜍脊柱有一明显变宽处为蟾蜍的骶髂关节。在骶髂关节水平以上1.5～2.0cm处剪断脊柱，再沿后段脊柱侧面剪开两侧皮肤，此时蟾蜍的躯干上部和内脏自然下垂，用粗剪刀剪除躯干上部和内脏，仅留下后肢、骶骨、脊柱以及紧贴于脊柱两侧的坐骨神经丛。

3．剥皮  左手持大镊子夹住脊柱断端，右手捏住其上皮肤的边缘，向下剥掉全部后肢的皮肤。然后将标本放在盛有任氏液的培养皿中。  

4．洗手和全部用过的手术器械。  

5．分离左右后肢  用大镊子夹住脊柱断端将标本背面向上，脊柱呈水平提起，剪除向上突起的骶尾骨，然后将标本翻过来腹面向上，沿正中线将脊柱剪为两半，并于耻骨联合中央剪开两侧大腿。标本放回盛有任氏液的培养皿中。   

6．制备坐骨神经-腓肠肌标本

（1）游离坐骨神经  在蛙板上铺一块纱布并滴上少许任氏液。取一侧后肢腹面向上放于蛙板上，用玻璃分针沿脊柱侧游离坐骨神经丛。然后将标本背面向上，循坐骨神经沟（股二头肌和半膜肌之间的肌间沟）游离坐骨神经大腿部至腘窝，剪断坐骨神经的所有分支。保留约1cm长与坐骨神经相连的脊柱后剪断脊柱，将游离干净的坐骨神经搭于腓肠肌上。

（2）完成坐骨神经-小腿标本  在膝关节周围剪掉全部大腿肌肉并用普通剪刀将股骨刮干净，然后在膝关节上1.5 cm处剪断股骨，剩下的部分就是坐骨神经-小腿标本。

（3）完成坐骨神经-腓肠肌标本  在坐骨神经-小腿标本的跟腱下方穿线结扎，于结扎线远端剪断跟腱，游离腓肠肌至膝关节处，然后沿膝关节腔将小腿其余部分剪掉，最后剩下的就是坐骨神经-腓肠肌标本。