学习目标和内容
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请通过本章学习,回答下列问题:
[1]生物素-亲合素系统反应特点?
[2]生物素-亲合素系统的应用?
第一节 生物素
生物素(Biotin)又称为维生素H或维生素B7,是一种水溶性维生素,其羧基经化学修饰后带有活性基团称为活化生物素,能结合抗原、抗体、酶等大分子。

第二节 亲合素和链霉亲合素
亲合素(avidin)和链霉亲合素(SA)是生物素天然的特异性结合物。亲合素也称为抗生物素蛋白或卵白素,由4个相同亚基组成的碱性糖蛋白,每个亲合素能结合4个生物素分子,二者亲和力比抗原-抗体亲和力高1万倍,链霉亲和素(SA)无糖基,非特异性低。

第三节 生物素-亲合素系统反应特点
1.特异性强:生物素与亲合素间高度专一。
2.敏感性高:1个亲合素结合4个生物素,具有放大效应。
3.稳定性好:比抗原-抗体亲和力高1万倍,反应不可逆。
4.实用性强:可以其他标记技术联合使用。

第四节 生物素-亲合素系统的应用
1.生物素-亲合素-生物素法(BAB):生物素化抗体+亲合素+生物素化酶,亲合素和生物素化酶分别加入。

2.亲合素-生物素-过氧化酶复合物法(ABC):生物素化抗体+ABC,利用复合物结合生物素化抗体,可极大提高酶在反应中的浓度,检测敏感度明显提高,且操作步骤少,容易实现标准化。

3.生物素-亲合素法(BA):生物素化抗体+亲合素化酶,操作简便。


