请通过本章学习，回答下列问题：

[1]放射免疫分析（RIA）测定原理？

[2]免疫放射分析（IRMA）测定原理？

[3]放射免疫分析与免疫放射分析的主要区别？

[4]放射免疫试验主要用于医学检测的哪些方面？优点和缺点是什么？

第一节  概述

1.元素：化学元素，具有相同的质子数的一类原子的总称。

2.同位素：具有相同质子数，不同中子数的同一元素的不同核素互为同位素。

3.放射性核素：在自然条件下发生自发性转变，由一种放射性核素转变为另一种放射性核素，同时释放射线（α、β、γ）的物质。

（1）α射线：高速运动的氦原子核（两个质子和两个中子），虽然电离作用最强，但穿透力弱（纸可以阻挡），体外无危害。

（2）β射线：高速运动的电子流（原子核释放一个电子和一个中微子），电离作用强于γ射线，但穿透力小于γ射线（铝箔可以阻挡）。

（3）γ射线：波长极短的电磁波（光子），电离辐射弱（没有电荷和质量），但能量高（波长短），且穿透力极强（铅板可以阻挡）。

4.常用放射性核素：能够释放β射线和γ射线的放射性核素。目前最常用125I。

（1）释放β射线：14C、3H和32P。

（2）释放γ射线：131I、125I、51Cr和60Co。

（3）常用放射性核素的半衰期比较：

5.放射性核素125I的优点：化学性质活泼，标记方法简单；电离辐射较β射线弱，对被标记物免疫活性影响小；释放的γ射线容易检测；半衰期适中（60天）。

6.γ射线检测方法：采用晶体闪烁计数器，主要包括碘化钠（砣）闪烁晶体、光电倍增管、计数器等，最终测定每分钟脉冲数（cpm）。

第二节  放射免疫分析方法  

1.放射免疫分析（radioimmunoassay, RIA）：用放射性核素标记小分子抗原，通过与限量特异性抗体竞争结合待测抗原，测定与抗体结合的标记抗原的放射性强度反应待测抗原含量（结果呈负相关）。

2.检测原理：标记抗原(Ag*)和待测抗原(Ag)与限量抗体(Ab)竞争性结合；Ag*定量，Ab限量；Ag*和待测Ag具有同等的与Ab结合能力；Ag*和待测Ag的结合价应大于Ab的结合数目；分离结合和未结合反应物，测定结合免疫复合物的放射性强度，通过标准品进行定量测定，结果待测抗原与测定的放射性强度呈负相关。

3.检测方法：包括平衡法和非平衡法。

4.分离技术：液体中反应并达到平衡的抗原抗体复合物并不沉淀，结合和未结合的Ag*共存于液相中，必须将二者分离后分别测定放射性强度，才能计算和获得标准曲线。

（1）聚乙二醇（PEG）法：破坏水化膜，非特异性沉淀大分子物质（免疫复合物），小分子物质（游离Ag*）不沉淀。选用分子量6000D聚乙二醇，终浓度7%-9%，pH6-9，可取得较好的分离效果。优点：分离完全，经济方便；缺点：非特异性结合率较高，受其他因素影响大。

（2）双抗体法：以第二抗体溶液作为分离剂。“第二抗体”是以第一抗体动物源性IgG作为免疫原。第二抗体可以结合免疫复合物，形成共沉淀，此外加入第一抗体同源动物IgG后，第二抗体可以与之结合，增加反应体系中的免疫复合物量，更容易离心获得免疫复合物。优点：分离特异性强、重复性好、非特异性少；缺点：反应时间长，抗体用量大。

（3）双抗体-PEG法：融合了上述两种方法的优点。

第三节  免疫放射分析方法

1.免疫放射分析（immunoradiometric assay, IRMA）：用放射性核素标记抗体，待测抗原和过量标记抗体特异性结合，用固相免疫吸附方法分离结合标记物（B）和游离标记物（F），测定结果呈正相关。

2.检测原理：标记抗体过量；非竞争；固相吸附分离；正相关。

3.检测方法：包括单位点法和双位点法。

第四节  放射免疫分析和免疫放射分析的比较

第五节  放射免疫试验的临床应用

在上世纪70～80年代曾广泛应用，范围包括各种激素、病毒抗原或抗体、肿瘤标志物、药物小分子等，但因其明显的缺点，已慢慢被酶免疫试验和化学发光免疫试验取代。目前只有少数医疗机构仍保留放射免疫试验室，开展特殊的检测项目，由于其自身仍在小分子检测方面具有一定优势，在如反三碘甲状腺原氨酸、胃泌素、醛固酮、血管紧张素-Ⅰ和Ⅱ等项目检测。