试管苗增殖与生根培养接种

一实训内容  

试管苗增殖与生根培养接种

二实训目的   

学习、掌握试管苗的增殖和生根培养外植体的处理、接种方法。 

三实训材料  

试管苗、镊子、剪刀、接种刀、增殖培养基、生根培养基、酒精灯等。

四方法步骤 

1无菌操作准备    

将经湿热灭菌装有培养基的培养容器、接种用具等置于超净台上，打开超净台的紫外灯，灭菌处理30 min。操作人员坐到超净台前，用浸有70%酒精的棉球擦超净台面、操作者手等部分。

2试管苗增殖接种  

点燃酒精灯，从装有无菌苗的培养瓶中取出无菌苗，置于无菌的培养皿中的无菌滤纸上，用灭过菌的刀和镊子配合操作，将芽丛分离或茎段切割，后打开培养容器盖子，将单个芽或茎段按极性方向垂直插入培养基，盖好培养容器盖子，置于超净台上适当位置。对接种用具、超净台面、操作者手等进行适当灭菌处理，继续接种。如此操作，直至完成。 

3试管苗生根接种   

从装有无菌苗的培养瓶中取出生长良好的无菌苗，置于无菌的培养皿中的无菌滤纸上，用灭过菌的刀和镊子配合操作，从芽丛基部处切下，去除老叶，只留下生长旺盛的不定梢，打开培养容器盖子，将去除老叶后的不定梢芽垂直插入培养基，盖好培养容器盖子，置于超净台上适当位置。对接种用具、超净台面、操作者手等进行适当灭菌处理，继续接种。如此操作，直至完成。

五训练要求    能针对试管苗的生长情况，采取不同的增殖方式；能针对需苗情况采取增殖还是生根；接种方法正确。

六实训报告   写出实训报告，内容包括试管苗的增殖接种方法和生根接种方法及其操作过程中的注意事项。

七考核标准

无菌操作准备工作准确               20分

增殖方法准确                       20分

增殖接种方式准确                   20分

生根接种前期处理方式准确           10分

生根接种方法准确                   20分

接种数量、位置适当                 10分