组培室器皿、器械的洗涤、灭菌

一实训内容  

组培室器皿的洗涤、灭菌

二实训目的 

为了防止污染，对所有与培养有关的器皿、用具进行洗涤并灭菌，对接种室、培养室等进行灭菌。

三实训材料  

新购置的玻璃器皿、已用过的玻璃器皿、金属器械、甲醛、高锰酸钾等。

四方法与步骤

1．洗涤

A玻璃器皿的洗涤、

①新购置的玻璃器皿的洗涤   因有游离碱性物质，使用前先用1%稀盐酸浸泡一夜，然后用肥皂水洗净，清水冲洗，最后用蒸馏水冲洗一次，干后备用。

②已用过玻璃器皿    先将残渣除去；用清水洗净，再用热肥皂水或洗衣粉洗净，清水冲洗干净，最后用蒸馏水冲洗一次，干后备用。

③对一些不宜刷洗的玻璃器皿如：吸管，滴管及较脏的器皿等先用去污粉和去油剂刷洗，自来水冲干净后，晾干，再浸入硫酸－重铬酸钾洗液中浸泡若干小时，用夹子取出在自来水冲洗干净，再用蒸馏水冲洗1－3遍，稍晾不滴水后置于干燥箱内烘干备用。

④对带有凡士林，石蜡，或胶布的器皿选用特殊方法处理后，再用常规方法洗涤。带有凡士林的器皿须先用废纸把凡士林擦去，再用汽油擦洗干净，然后用热肥皂水煮沸半小时，刷洗后，自来水冲干净。若带有石蜡，可在玻璃器皿下垫几层废纸，放入60－70℃温箱中加热1－2小时，待石蜡融化后，再用废纸反复擦2－3次即去石蜡再泡入洗衣粉的热水中洗干净最后用自来水冲洗，蒸馏水冲洗干净若有胶布粘着物，先用70%酒精棉球擦数遍，溶解粘胶物，并用少许去污粉刷抺，再用洗衣粉煮沸半小时，刷洗干净，自来水冲洗，晾干，再泡入洗液。

B金属器械

新购置金属器皿因其上有润滑油或防绣油，用蘸有四氯化碳（CCl₄）布擦去油脂，再用湿布擦净，干燥备用。

2．灭菌

A器皿和用具常用灭菌方法：

①热压灭菌法   将洗净的培养器皿，用具，用牛皮纸包好，放入高压消毒锅中，0.105MPa下灭菌20－30分钟。

②干热灭菌法   洗净的玻璃器皿置于电热干燥箱中，150℃40分钟或120℃两小时，待冷却后使用。

B无菌室灭菌（接种室、培养室）

1. 用新洁尔灭擦抺工作台，70%酒精擦拭超净工作台。

   ②薰蒸：用甲醛、高锰酸钾提前1－3天薰蒸密封房间（甲醛倒入蒸发皿加热，用量10ml/m²，或用甲醛（HCHO）与高锰酸钾（KMnO₄）以10：1比例混合倒入蒸发皿加热）。

   ③接种前用70－75%酒精喷雾，使飘在空气中的尘埃沉积下来。

   ④用紫外光灯进行照射灭菌 超净工作台及用具30－40分钟。

五训练要求

能根据正确洗涤植物组织培养实验室主要器皿、器械；能正确对各种各种器皿、器械进行灭菌；能正确对接种室、培养室进行灭菌。

六实训报告

写出实训报告，内容包括实验室主要器皿、器械的洗涤方法及灭菌方法；接种室、培养室等灭菌操作方法。

七考核标准

能正确洗涤组培室各种器皿、器械                   20分

能准确选用洗涤剂                                 20分

能正确选用灭菌方法对器皿灭菌                     20分

能正确选用灭菌方法对金属器械灭菌                 20分

能正确选用灭菌方法对接种室、培养室灭菌           20分