实训一：油松种子质量检测
项目1 物理性形状测定
一、目的要求
掌握测定和计算种子净度、千粒重和含水量的方法，并进一步了解种子净度、千粒重和含水量对种子批质量的影响和相关关系。
二、备品与材料
受皿天平、1/1000天平、种子检验板、直尺、毛刷、小畚箕、胶匙、镊子、放大镜、中小培养器皿、小尺、盛种容器、钟鼎式分样器或横隔式分样器、干燥箱、温度计、干燥器、称量瓶（或坩埚）、本地区主要造林树种的种子2～3种等。
三、内容与方法
在种苗实验室以组为单位，利用所学知识在教师指导下对供试验种子进行测定。
（一）种子净度测定
1．测定样品的提取 将送检样品用四分法或分样器法进行分样，取得两份样品。
2．测定样品的分析 将两份测定样品分别铺在种子检验板上，仔细观察，区分出纯净种子、废种子及夹杂物，用天平分别称量。
3． 种子净度的计算和分析误差
按净度计算公式计算测定结果，并进行误差分析，填写种子净度分析记录表（表4）。
表1 净度分析记录表
编号__________ 树种____________ 样品号______________ 样品情况______
测试地点 环境条件：室内温度_____________℃ 湿度_________%
测试仪器：名称______________ 编号______
方法 | 试样重（g） | 纯净种子重(g) | 其他植物种子重(g) | 夹杂物重（g） | 总重(g) | 净度(%) | 备注 |
实际差距 | 容许差距 | ||||||
本次测定： 有效 □; 测定人 无效 □ 校核人
测定日期： 年 月 日
（二）种子千粒重的测定（采用百粒法）
1．测定样品的选取 将纯净种子铺在种子检验板上，用四分法分到所剩下的种子略大于所需量。
2．点数和称量 从测定样品中不加选择地点数种子，点数时将种子每5粒放成一堆，两个小堆全并成10粒的一堆，取十个小堆合成并成100粒，组成一组。用同样方法取第二组，第三组……，直至第八组，即为八次重复，分别称各组的重量，记入种子千粒重测定记录表5中，各重复称量精度同净度测定时的精度。
3．计算千粒重 根据八个重量的称量读数求八个组平均重量（X），然后计算标准差（S）及变异系数（C），当标准差和变异系数不超过规定限度时，即可计算100粒种子的平均重量，再推算出1000粒种子的重量。
表2 种子千粒重测定记录表（百粒法）
编号________树种__________ 样品号________ 样品情况_________
测试地点______________环境条件：温度___________℃ 湿度__________%
测试仪器：名称________ 编号_______测定方法__________________
重复号 | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | 7 | 8 | 9 | 10 | 11 | 12 | 13 | 14 | 15 | 16 | |
x ,g | |||||||||||||||||
标准差 | |||||||||||||||||
平均重量 | |||||||||||||||||
变异系数 | |||||||||||||||||
千粒重，g 10× | |||||||||||||||||
第 组数据超过了容许误差，本次测定根据第 组计算
本次测定： 有效 □ 无效 □ 测定人 校核人________
测定日期： 年 月 日
项目2 种子发芽测定
一、目的要求
测定种子的发芽能力，是为了确定播种量和一个种批的等级价值。要求学会种子发芽测定的操作技术，并学会计算种子发芽力的各项指标。
二、备品与材料
恒温箱、培养皿、滤纸、纱布、脱脂棉、镊子、温度计（0～100℃）、取样匙、直尺、量筒、烧杯、祝尔马林、高锰酸钾、标签、电炉、蒸煮锅、蒸馏水、滴瓶、解剖刀、解剖针、本地区主要造林树种2～3种等。
三、内容与方法
在种苗实验室，以组为单位，利用所学知识在教师指导下对供试验种子进行测定。
（一）测定样品的提取
用四分法将纯净种子区分成4份，从每份中随机数取25粒组成100粒，共取4个100粒，即为4次重复。
（二）消毒灭菌
为了预防霉菌感染，干扰检验结果，检验所使用的种子和各种物件一般都要经过消毒灭菌处理。
1．检验用具的消毒灭菌 培养皿、纱布、小镊子仔细洗净，并用沸水煮5～10分钟，供发芽试验用的恒温箱用喷雾器喷洒福尔马林，密封2～3天后再使用。
2．种子的消毒灭菌 目前常用的有福尔马林、高锰酸钾、升汞、过氧化氢等。药剂种类不同，处理的方法和时间也不一致
（1）福尔马林 将纱布袋连同其中的种子测定样品放入小烧杯中。注入0.15%的福尔马林溶液以浸没种子为度，随即盖好烧杯。20分钟取出绞干，置于有盖的玻璃皿中闷半小时，取出后连同沙布用清水冲洗数次，即可进行浸种处理。
（2）高锰酸钾 用0.2～0.5%的高锰酸钾溶液浸2小时，取出用清水冲洗数次。
（三）浸种
落叶松、油松、马尾松、云南松、樟子松、杉木、侧柏、水杉、黄连木、胡枝子等，用始温为45℃水浸种24小时，刺槐种子用80～90℃热水浸种，待水冷却后放置24小时，浸种所用的水最好更换1～2次；杨、柳、桉等则不必浸种。
（四）置床
一般中粒、小粒种可在培养皿中放上纱布或滤纸作床。在培养皿不易磨损的地方（如底盘的外缘）贴上小标签，写明送检样品号、重复号、姓名和置床日期，以免错乱。然后将培养皿盖好放入指定的恒温箱内。根据树种的特性使用变温或恒温，规定使用变温的，每昼夜应当保持低温16小时，高温8小时，温度的变换应在3小时以内逐渐完成，湿度为60～70%。
（五）发芽测定的管理
经常检查发芽环境的温度，保持发芽床湿润，注意充分换气，将感染霉菌的种子及时取出（不要使它们触健康的种粒）用清水冲洗。发霉严重时整个滤纸和坐垫、甚至整个培养皿都要更换。这些情况在发芽记录表7中应及时记载。
（六）观察、评定和记载
发芽测定期间，每天或定期进行观察记载，填写发芽测定记录表。记录时用分数表示，分子为检查日已发芽种子数，分母为检查日未发芽种子数。
（七）测定结果的计算
根据发芽测量记录结果，计算种子发芽各项发芽指标。
表3 发芽测定记录表
树种 | 预处理方法 | 送样品 编 号 | 温 度 | |||||||||||||||||||||
其他记载 | 光 照 | |||||||||||||||||||||||
预处 理日 期 | 组 号 | |||||||||||||||||||||||
1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | 7 | 8 | 9 | 10 | 11 | 12 | 13 | 14 | 15 | … | 41 | 42 | |||||||
逐 日 发 芽 粒 数 | ||||||||||||||||||||||||
置床日期 | 1 | |||||||||||||||||||||||
2 | ||||||||||||||||||||||||
开始发芽日期 | 3 | |||||||||||||||||||||||
4 | ||||||||||||||||||||||||
检验员 年 月 日
表4 发芽测定结果表
编号______ 树种_______ 样品号________ 样品情况测定地点
环境条件：室内温度_______℃ 湿度____% 测试仪器：名称_______ 编号
预处理 置床日期_______ 测定条件
组 号 | 发芽势 | 发芽率 | 未发芽粒 | 发霉日期及换垫日期 | 平 均 发 芽 势 | 平 均 发 芽 率 | 平均 绝对 发芽 率 | 平 均 发 芽 速度 | 备 注 | ||||||||||
天数 | % | 天数 | % | 腐 坏 | 异 状 | 新 鲜 | 空 粒 | 硬 粒 | 涩粒 | 其它 | 计 | % | |||||||
1 | |||||||||||||||||||
… | |||||||||||||||||||
合计 | |||||||||||||||||||
组间最大差距____容许差距_______ 本次测定： 有效 □ 无效 □
测定人________校核人_______ 测定结束日期______年____月____日
四、注意事项
发芽测定期间，要依每天或定期观察的结果，认真填写发芽测定记录表；正确区分正常幼苗、不正常幼苗和未发芽粒数，及时取出感染霉菌的种子，并用清水冲洗，发霉严重时及时更换发芽床。
五、实验报告要求
（一）填写种子发芽测量记录表，计算种子各项发芽指标。
（二）说明测定种子发芽率在生产工作中的意义。
项目3 种子生活力测定
一、目的要求
通过本次实验进一步了解种子生活力测定的意义，掌握种子生活力测定的方法。
二、备品与材料
种子检验板、烧杯、解剖刀、小镊子、手持放大镜、量筒、培养皿 、解剖针、胶匙、靛蓝染料、四唑染料、本地区主要造林树种的种子3～5种等。
三、内容与方法
在种苗实验室，以组为单位，利用所学知识在教师指导下对供试验种子进行测定。
（一）测定样品提取
从净度测定后的纯净种子中随机数取100粒种子作为一个重复，共取4个重复。此外还需抽取约100粒种子作为后备，以便代替取胚时弄坏的种子。以松属树种为例。
（二）浸种取胚
将四组样品和后备种子浸入室温水中。浸种时间因树种而异，松属、雪松属的种子在室温下3～5天，刺槐、银合欢等种子可用锐利的解剖针或小刀等仔细地从胚根后面弄破种皮，然后用室温水浸种24小时，也可现用80～90℃ 水烫种，搅拌到室温，然后浸种24小时。浸种后，分组取胚，沿种子的棱线切开种皮和胚乳，取出种胚，种胚取出后放在盛有清水或垫有潮湿滤纸、纱布玻璃器皿里，以免种胚干燥萎缩而丧失生活力。取胚时随时记下空粒、腐烂粒、感染了病虫害的种粒以及其他显然没有生活力的种子粒数，分组记入记录表，如取胚时由于人为技术而破坏种胚，可以从后备组中任取一粒取胚补上。大粒种子如板栗、锥栗、核桃、银杏等可取"胚方"染色。
（三）溶液配制
靛蓝用中性蒸馏水配成浓度为0.05～0.1％的溶液，随配随用，不宜存放过久，试剂的用量应该能够完全浸没种胚。四唑用中性蒸馏水配成浓度为0.1％～1.0％的溶液（一般用0.5％）。
（四）染色
将种胚分组浸入染色溶液里，上浮者要压沉。靛蓝溶液在气温20℃～30℃时约需浸2～3小时。四唑溶液在气温25℃～30℃的黑暗或弱光环境中保持12～48小时，染色时间因树种而异，一般树种最少需3小时。
（五）观察记录
经过染色的种子分组放在潮湿的滤纸上，借助手持放大镜或立体放大镜逐粒观察。根据染色的部位、染色面积的大小和染色程度，逐粒判断种子的生活力。通过鉴定，将种子评为有生活力和无生活力两类。
（六）结果计算
测定结果以有生活力种子的百分率表示，分别计算各个重复的百分率，重复间最大容许差距与发芽测定相同。如果各重复中最大值与最小值没有超过容许误差范围，就用各重复的平均数作为该次测定的生活力。
表5 种子生活力测定记录表
编号______ 树种________ 样品号________ 样品情况________
染色剂___________ 浓度 测试地点
环境条件：温度____________℃ 湿度__________%
测试仪器：名称______________ 编号_______
重复 | 测定种子粒数 | 种子解剖结果 | 进行染色粒数 | 染色结果 | 平均生活力% | 备注 | |||||||
腐烂粒 | 涩
粒 | 病虫害粒 | 空
粒 | 无生活力 | 有生活力 | ||||||||
粒数 | % | 粒数 | % | ||||||||||
1 | |||||||||||||
2 | |||||||||||||
3 | |||||||||||||
4 | |||||||||||||
平均 | |||||||||||||
测定方法 | |||||||||||||
实际差距________容许差距___________ 本次测定： 有效 □ 无效 □
测定人_______ 校核人_________ 测定日期_____年__月___日
四、注意事项
鉴定的主要依据是染色的部位，而不是染色的深浅；如发现靛蓝水溶液有沉淀，可适当加量，最好随配随用，不宜存放过久。
五、实验报告要求
（一）填写种子生活力的测定记录表。
（二）写出各种测定方法的不同染色原理。
项目4 种子优良度测定
一、目的要求
通过本次实验进一步了解种子优良度测定的意义，掌握种子优良度测定的方法。
二、备品与材料
解剖刀、解剖剪、手持放大镜、镊子、种子检验板或木垫、小烧杯、玻璃板、白纸、锤子、铝盒、载玻片、本地区主要造林树种的种子3～5种等。
三、实验内容与方法
在种苗实验室，以组为单位，利用所学知识在教师指导下对供试验种子进行测定。
（一）测定样品提取
从纯净种子中，随机提取4组测定样品。种皮坚硬难于剖切的，可在测定前浸种，使种皮软化。
（二）测定方法
采用解剖法。先观察供测种子的外部情况，然后分别逐粒剖开，观察种子内部情况，区分优良种子与劣质种子。各个重复的优良种子、劣质种子以及剖切时发现的空粒、涩粒、无胚粒、腐烂粒和虫害粒的数量记入表10中。
（三）计算结果
测定结果以优良种子的百分率表示，分别计算各个重复的百分率，并按表3－13检查各次重复间的差距是否为随机误差，如果各重复中最大与最小值之差没有超过容许差距范围，就用各重复的平均数作为该种批的优良度，用整数的百分比来表示。如果各重复中最大值与最小值之差超过表3－14所列的容许范围，应按发芽重新测定的规定重新测定并计算结果。
表6 种子优良度测定记录表
编号______ 树种 样品号 样品情况
测试地点____________ 环境条件：温度__________℃ 湿度_____________%
测试仪器：名称_____________ 编号______________
重复 | 测定种子粒数 | 观察结果 | 优良度% | 备注 | |||||
优良粒 | 腐烂粒 | 空粒 | 涩粒 | 病虫害粒 | |||||
1 | |||||||||
2 | |||||||||
3 | |||||||||
4 | |||||||||
平均 | |||||||||
实际差距 | 容许差距 | ||||||||
测定方法 | |||||||||
本次测定： 有效 □ 无效 □ 测定人______校核人_____
测定日期： 年 月 日
四、注意事项
对照主要造林树种种子优劣标志表鉴定种子的优劣。剖开切面时要顺着种胚通过，以便观察种胚全貌。
五、实验报告要求
（一）填写种子优良度的测定记录表。
（二）填写《林木种子质量检验合格证书》或《林木种子质量检验结果单》。
