目录

  • 1 绪论 (2学时)
    • 1.1 蛋白质组学发生发展
    • 1.2 蛋白质组学面临的问题与挑战
  • 2 蛋白质组学中的蛋白质分离(4学时)
    • 2.1 蛋白质提取技术(2学时)
    • 2.2 蛋白质分离技术(2学时)
  • 3 蛋白质组学的蛋白质鉴定(4学时)
    • 3.1 质谱鉴定技术(2学时)
    • 3.2 质谱鉴定蛋白质策略(2学时)
  • 4 蛋白质翻译后修饰鉴定(2学时)
    • 4.1 磷酸化修饰的鉴定
    • 4.2 糖基化修饰的鉴定
  • 5 蛋白质组学的定量研究技术(4学时)
    • 5.1 荧光定量分析技术(2学时)
    • 5.2 基于质谱的蛋白质组定量分析技术(2学时)
  • 6 互作蛋白质组学(2学时)
    • 6.1 蛋白质相互作用离体研究技术
    • 6.2 酵母双杂交技术
    • 6.3 免疫共沉淀技术
    • 6.4 其它
  • 7 蛋白质组学的应用(6学时)
    • 7.1 学生分组进行PPT汇报(线下)
基于质谱的蛋白质组定量分析技术(2学时)

    质谱是蛋白质组学研究的重要工具,它不仅可测定肽的序列,而且结合内标可准确定量蛋白质。常见的基于质谱的蛋白质定量方法有很多,根据有无引入同位素(稳定),可分来两类:基于同位素的质谱鉴定技术,和Lable-free技术。

    同位素标记的方法根据标定的时间又可分为代谢标记和提取后标记。下面让我们先来了解一下代谢标记法。

           

    提取后标记则省去繁琐的培养步骤,较代谢标记便捷得多,如ICAT、iTRAQ技术等,已成为如今蛋白质组定量的主流技术。尤其是iTRAQ技术可实现多个样本的同时定量分析。

    Lable-free技术是近几年才提出的应用于定量蛋白质组学研究的新技术,该技术无需同位素标记,目前尚处于发展之中。


  蛋白质芯片技术在此未作介绍。它是近年来发展起来的一种高通量蛋白功能分析技术,可用于蛋白质表达谱分析,研究蛋白质与蛋白质的相互作用,甚至DNA-蛋白质、RNA-蛋白质的相互作用,筛选药物作用的蛋白靶点等。可进行定量分析。同学们可以将之作为你们PPT汇报的内容,但需要有应用实例。