目录

  • 1 绪论 (2学时)
    • 1.1 蛋白质组学发生发展
    • 1.2 蛋白质组学面临的问题与挑战
  • 2 蛋白质组学中的蛋白质分离(4学时)
    • 2.1 蛋白质提取技术(2学时)
    • 2.2 蛋白质分离技术(2学时)
  • 3 蛋白质组学的蛋白质鉴定(4学时)
    • 3.1 质谱鉴定技术(2学时)
    • 3.2 质谱鉴定蛋白质策略(2学时)
  • 4 蛋白质翻译后修饰鉴定(2学时)
    • 4.1 磷酸化修饰的鉴定
    • 4.2 糖基化修饰的鉴定
  • 5 蛋白质组学的定量研究技术(4学时)
    • 5.1 荧光定量分析技术(2学时)
    • 5.2 基于质谱的蛋白质组定量分析技术(2学时)
  • 6 互作蛋白质组学(2学时)
    • 6.1 蛋白质相互作用离体研究技术
    • 6.2 酵母双杂交技术
    • 6.3 免疫共沉淀技术
    • 6.4 其它
  • 7 蛋白质组学的应用(6学时)
    • 7.1 学生分组进行PPT汇报(线下)
蛋白质提取技术(2学时)

    同学们注意:何华勤编著的《简明蛋白质组学》中的“第2章 蛋白质组学研究技术”中的部分内容与后面章节重复较多,本课程将它们合并到后面章节再作介绍。

    这一讲的内容是蛋白质提取技术,对应的教材内容为: 2.1 表达蛋白质组学(P11-15) ;3.1 蛋白质样品制备的基本方法,3.2蛋白质分步提取及亚细胞蛋白质提取(P39-49)。

    蛋白质组中的蛋白质分离包括两个方面的内容:蛋白质提取和蛋白质的分离。蛋白质提取技术是蛋白质组样品分离成功的关键步骤,直接影响蛋白质组研究结果。

    首先我们先来看一下表达蛋白质组学研究的技术流程,了解蛋白质的提取和分离在这一流程中的位置。


    蛋白质提取方法有2种:一步法和分步提取法。研究人员应根据实验设计和研究目的不同,选择不同的蛋白质提取溶剂和不同的蛋白质样品制备方法。


    蛋白质提取一般有哪些步骤呢?我们一起来看一下。

    为获得最佳的蛋白质组分析效果,提取后的蛋白质样品需要变性,同时尽可能使其中的蛋白质充分溶解,下面我们来看一下,如何做到提取蛋白的变性且溶解。


     同学们,通过上述学习,我们了解了蛋白质组学中的提取技术是如何做到“竭泽而渔”的,下一讲“蛋白质分离技术”将给同学们讲解如何分离得到你心目中的“鱼”。

     下列PPT供同学们课后复习使用。