一、原材料的质量控制（quality controlling of material ）

v原材料的质量控制是要确保编码生物制品的DNA序列的正确性，重组微生物来自单一克隆，所用质粒纯而稳定，以保证产品质量的安全性和一致性。

二、培养过程的质量控制（quality controlling of  culture process ）

v在工程菌菌种贮存中，要求种子克隆纯而稳定；

v在培养过程中，要求工程菌所含的重组质粒稳定，始终无突变；

v在重复生产发酵中，工程菌表达稳定；始终能排除外源微生物污染。

v产品应有种子批系统，并证明种子批不含致癌因子，无细菌、病毒、真菌和支原体等污染，并由原始种子批建立生产用工作细胞库。

v原始种子批须确证克隆基因DNA序列，详细叙述种子批来源、方式、保存及预计使用期，保存与复苏时宿主载体表达系统的稳定性。

三、纯化工艺过程的质量控制（quality controlling of depuration process）

v产品要有足够的生理和生物学试验数据，确证提纯物分子批间保持一致性；外源蛋白质、DNA与热原质都控制在规定限度以下。

四、目标产品的质量控制与检测

1.质量控制

v基因工程药物质量控制主要包括：产品的鉴别、纯度、活性、安全性、稳定性和一致性。

2.质量检测

1）产品的鉴别（discrimination of production ）

有许多方法可用于全面鉴定，如下表：

重组蛋白质药物产品常用的鉴定方法

①电泳方法：SDS-PAGE，等电点聚焦，免疫电泳

②免疫学分析方法：放免法（RIA），放射性免疫扩散法（RID）

酶联免疫吸附法（ELISA），免疫印渍（immunoblotting）

③受体结合试验（receptorbinding）

④各种高效液相分析法（HPLC）

⑤肽图分析法

⑥EdmanN末端序列分析法

⑦圆二色谱（CD）

⑧核磁共振（NMR）

2）纯度分析（analysis of purity ）

它包括目的蛋白质含量测定和杂质限量分析两个方面的内容。

（1）目的蛋白质含量测定

通常采用的方法有还原性及非还原性SDS-PAGE、等电点聚焦、各种HPLC、毛细管电泳（CE）等。

（2）杂质

 ①蛋白类杂质

 ②非蛋白类杂质：主要有病毒和细菌等微生物、热原质、内毒素、致敏原及DNA。

3）生物活性测定（measurement  of bio-activity ）

v是保证基因工程药物产品有效性的重要手段，需要进行动物体内试验和通过细胞培养进行体外效价测定。

v重组蛋白质是一种抗原，可用放射免疫分析法或酶标法测定其免疫学活性。

v体内生物活性的测定要建立适合的生物学模型。体外生物活性测定的方法有细胞培养计数法、3H-TαR掺入法和酶法细胞计数等。 

4）安全性评价：药代动力学和毒理学研究，遗传病理性质的考查。

5）稳定性检测：是评价药品有效性和安全性的重要指标之一。

6）产品一致性的保证：从原料到成品的每一步骤都进行严格的条件控制和质量检定，才能保证各批最终产品都安全有效，含量和杂质限度一致并符合标准规定。

五、产品的保存（conservation of production ）

1、液态保存（ conservation of liquid ）

（1）低温保存：液态蛋白质样品在-10～-20℃以下冰冻保存比较理想。

（2）在稳定pH条件下保存：蛋白质较稳定的pH一般在等电点，因而保存液态蛋白质样品时，调到其稳定的pH范围内。

（3）高浓度保存：一般蛋白质在高浓度溶液中比较稳定，这是因为液态蛋白质容易受水化作用的影响，保存时浓度不能太低，否则可能引起亚基解离和表面变性。

（4）加保护剂保存：加入某些稳定剂可以降低蛋白质溶液的极性，以免变性失活。

2、固态保存（conservation of solid ）

一般蛋白质含水量超过10%时容易失活。含水量降到5%时，在室温或冰箱中保存均比较稳定，在干燥器中在4℃以下可保存相当长的时间。