个人介绍
微生物学实验 邹娟
视频介绍
    《细菌的革兰氏染色及其形态观察》微课视频,以学生自己分离纯化的细菌为检测对象,以标准菌株Staphylococcus aureus 和Escherichia coli为对照,进行革兰氏染色,探究待测细菌细胞形态和排列方式,激发学生学习兴趣。 通过教师的微视频演示,学生实操,从而加深学生对革兰氏染色原理的理解,对细菌细胞壁结构和组成知识点的记忆。 以悬念结课,留下2个疑问:1.细菌革兰氏染色在科学研究和医疗卫生领域等方面的意义。2.如何对已分离纯化的细菌进行进一步鉴定。
教师团队

邹娟 教师

教学设计

                               


教学


  1学习革兰氏染色的操作技术,掌握光学显微镜下细菌形态观察的基本方法,了解革兰氏染色的意义。

  2. 加深对革兰氏染色原理的理解,巩固细菌细胞壁结构和组成专业知识点。



验 设计

思路

承接上一实验项目土壤微生物的分离纯化,将革兰氏染色的理论知识学以致用。学生从土壤中分离纯化得到的细菌进行革兰氏染色光学显微镜下细菌形态观察加深对革兰氏染色机理的理解,巩固细菌细胞壁结构和组成知识点实验小结拓展延伸。
 

 

 

 

 

 
 

经过上一实验项目土壤微生物的分离纯化,学生从土壤中分离纯化了菌落大小、颜色、形态不同的细菌。该实验对分离获得的细菌进行革兰氏染色并利用显微镜观察这些经过染色后的细菌细胞形态和排列。

 

【承接前一个实验,利用学生自己分离纯化的细菌,作为本次实验的检测对象,激发学生探索欲望】

 

1.实验项目:细菌的革兰氏染色和形态观察

 

2.实验目的:1.1 掌握革兰氏染色的原理和方法;

            1.巩固无菌操作技术;

            1.掌握光学显微镜下观察细菌形态的基本方法。

 

3. 实验原理

 


  

G+细菌细胞壁肽聚糖含量高、壁厚、脂质含量低; G-细菌细胞壁肽聚糖含量低、交联度低、壁薄且脂质含量高。               

       【回顾细菌细胞壁结构】

 

初染时,革兰氏染色可将所有细菌染上草酸铵结晶紫的紫色;碘液媒染后形成紫色的复合物;用乙醇处理时, G+细菌细胞壁肽聚糖网孔收缩,能截留紫色复合物,菌体呈紫色。而G-细菌细胞壁上脂质溶解,交联度低的薄肽聚糖层,不足以滞留的紫色复合物,菌体呈无色,复染后,呈复染剂颜色(红色)。                     

 

【从细胞壁结构特性,深入到细菌革兰氏染色的原理】

 

4. 实验器材

     药品:革兰氏染色液(无菌生理盐水、草酸铵结晶紫染液、卢戈氏碘液、95%乙醇、番红染液)、镜油、镜油清洗剂。
     菌种:A.  12  h Escherichia coli斜面培养物,18-24 h Staphylococcus aureus斜面培养物;B. 同学们自己从土壤中分离纯化的细菌。
    其它物品:载玻片,接种环,酒精灯等。
 

                                         讲授为主辅以微视频直观教学

 




 
 

1.      革兰氏染色的操作方法

 


 

【细菌的革兰氏染色流程图,便于理解】

 

1.1 制片

    ①涂片: 在载玻片滴加生理盐水,取斜面培养物,于生理盐水中涂抹形成薄膜;
    ②干燥:自然干燥;
    ③固定:将涂菌面朝上,通过火焰2~3次。
 1.2 初染:草酸铵结晶紫染液覆盖涂菌部位,染色1~2min后,水洗。
 1.3 媒染:卢戈氏碘液冲覆盖1 min,水洗。
 1.4 脱色:95%乙醇脱色20~30  s,立即水洗。
 1.5 复染:番红复染液染色2 min,水洗。
 

【微视频演示细菌革兰氏染色的操作方法】

 

2.      光学显微镜下观察细菌形态

 


 

【微视频演示操作方法】

 
实验结果     

绘图:绘制标准菌株S.aureusE. coli和待测菌株革兰氏染色图。


绘图要求:

     1. 在所观察的图像中选取典型部位绘图,要求左眼观察图像,右眼观察绘图;

2. 杆菌应注意长度与直径之比,球菌应注意排列状况;

        3. 图下方应标明图题(包括放大倍数、染色结果等)。

   1. 革兰氏染色有何重要意义?

   2. 如何对上堂实验中获得的细菌进行进一步鉴定?
                【拓展延伸】
 




 
 

《微生物学实验》是《微生物学》理论课程的配套课程,主要通过实验探索过程加深对理论知识的理解和记忆。该实验通过以下方法,达到承前启后,将细菌细胞壁结构和组成知识点内化的目的。

 1. 承接上堂实验课,将学生自己分离纯化的细菌作为检测对象,激发学生学习兴趣。实验室提供标准菌株Staphylococcus aureusEscherichia coli做对照,用于检测实验结果是否正确。
 2. 利用微视频,使革兰氏染色操作流程和显微镜下细胞形态观察方法清晰化,便于课前预习、课中模仿、课后巩固。
 3. 通过实验,加深学生对革兰氏染色原理的理解,对细胞壁结构和组成的记忆。
 4. 悬念结课,留下疑问,把教学内容进一步延伸,启发学生思考。
 


参考教材

1.《微生物学实验(第四版)》,沈萍,陈向东主编,高等教育出版社。

2. 《Microbiology》LansingM. Prescott et al. ,沈萍  彭珍荣主译,2003

3. 《食品微生物学实验技术(第2版》,牛天贵主编、中国农业大学出版社

课程评价

教学资源
课程章节 | 文件类型   | 修改时间 | 大小 | 备注
1.1 细菌的革兰氏染色及其形态观察
视频
.mp4
2017-11-14 609.43MB
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